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g418如何配制
问:最近要做稳定转染了,但不知道如何配制G418,有一些细节想问问大家,我打算用PBS来配,我想问问是用高压过的PBS来配,还是用未高压的PBS配,配完了是不是
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细胞接种密度
问:最近的一个实验困扰我许久,就是关于给药剂量的问题,具体如下: 我在培养瓶中按1*10E6密度观察了心肌细胞的搏动和药物的干预情况,接下来想做MTT,需要用9
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质体转染293细胞后,细胞漂浮死亡?
问:这几天做293细胞的脂质体转染,为腺病毒的包装阶段.用最小的培养瓶(好像是25ml的),加入脂质体10μl,pacI酶切纯化物8μg 进行转染.细胞最密处为
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Intercellular Adhesion Molecules (ICAM-1, VCAM-1, and LFA-1) in Adenocarcinoma of Lung: Technical As
Cell adhesion molecules (CAMs) such as intercellular adhesion molecule (ICAM-1),
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caspase-3的检测方法
问:在本版里有看到过有关caspase-3的检测方法(1):免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞(2):western blot 理想结果
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做稳定转染选择何种质粒提取试剂盒
问:我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢答:您的情况我们去年也
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请教 luciferase 的 具体操作PROTOCOL
问:我要做LUCIFERASE 了,可是我一点概念都没有。有哪位有具体的操作PROTOCOL?还有一些白痴问题luciferase 要检测什么呢?是把我的带有L
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GFP转染后克隆筛选
问:我最近对肿瘤细胞转染GFP,其中不含有其他外源性基因。转染后短期内发现阳性细胞非常多,可是随着时间及细胞的增殖,培养孔内的细胞总数在不断的增加,但是发绿色荧
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免疫磁珠分选的问题
问:现用免疫磁珠(美天妮)分选cd4+和cd8+T淋巴细胞,效果不是太理想。单个核细胞2106,分离出cd4+只有1105个,buffer等试剂都没有问题。不知
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细胞稳定转染建系后再转染的问题
问: 细胞稳定转染建系后,转染的质粒细胞内本身有较高表达,我的质粒是点突变的质粒,我做的是稳定转染,按理论稳定建系后不应该对细胞增值有影响的。根据实验设计,我往
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如何提高U251的转染效率
问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectami
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免疫荧光双标
问:神经干细胞nestin和EphrinA4的免疫荧光双标怎么做?答:过程和一般的免疫染色一样就是封闭的时候用两种血清混合封闭1:1加入一抗和二抗的时候也是混合
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Immunohistochemical Analysis of 8-Nitroguanine, A Nitrative DNA Lesion, in Relation to Inflammation-
Chronic inflammation is induced by various infectious/infected agents and by man
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转染过程
问:哪位高手给分别指点一下脂质体和质粒转染的具体过程!答:具体过程都大至差不多,一管混匀质粒,另一管混匀脂质体,脂质体混匀后过几分钟,逐滴加入混匀的脂质体,温柔
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稳定转染细胞株的鉴定
问:目的蛋白7kd,筛了稳定株,可western检测不到,因为电泳时marker也跑得不好,因此不能确定是假阳性。载体上带了myc tag,不知做免疫荧光来检测