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记忆性B细胞介导的抗体应答
1.留存抗体和桨细胞 抗原清除后,体内留存的抗体可特异性地直接结合再次出现的病毒颗粒、细菌和寄生虫,对后者实施中和作用和调理功能,构成记忆性抗感染的第一道防线,
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小鼠腹水抗体的制备
1.抗原的处理与小鼠腹水粗抗体的收集现在以B亚基的抗体制备为例说明:取2mg的蛋白,溶于100µl的10%SDS中,加入等体积的上样缓冲液,沸水浴3min,进行
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影响制备高效价专一性抗血清的主要因素
1. 抗原本身的有关性质:抗原刺激免疫动物产生抗体的能力,是否使用佐剂,注射途径及注射间隔时间等。2. 抗原必须纯化:对于免疫用的抗原,成分必须均一,除了作为免
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非标记抗体免疫电镜操作步骤
1.经典法 (1)将被检病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。 (2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。 (3
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E.coli/ phage 裂解液预吸附血清
1. 将 E.coli /phagelysate 以 1:10-20 稀释在 TBST溶液中。2. 将 4 张 82mm 的 nitrocellulosemem
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从免疫血清纯化抗体
从免疫血清纯化抗体 1. 剪取一小条0.45 μm 的硝酸纤维膜,置于1.5ml eppendorf 管中,浸没于1 ml 1 mg/ml 的抗原溶液中,5 m
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感知机制和反馈调控途径
1.激活性受体和抑制性受体 几乎所有的免疫细胞都表达抑制性受体。抑制性受体与激活性受体并存,是抑制性受体能够显示反馈活性的前提。因为,没有激活和增殖,也就无所
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PCR产物的检测点杂交
1.寡核苷酸探针杂交 [试剂与配置] 预杂交液:5SSC,5Denhadrt, 0.5%Triton X-100 2
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免疫组化的经验总结-操作要点和技巧
1. 固定:最好用 4% 的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合
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杂交瘤细胞的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨
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白细胞的纯化
1.低渗处理法 [试剂及配制] (1)蒸馏水 (2)1.8%氯化钠溶液 [操作方法] (1)向
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单克隆抗体技术-脾细胞
1.材料 (1) 免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2) 1640培养液 (3) 2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1) 拉颈或用CO2
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影响免疫电镜的因素
1.标记物 用于电镜观察的标记物有三类:一类是电子密度致密的标记物,如铁蛋白、辣根过氧化物酶等。另一类则是放射性同位素,如135 I、35 S、32 P、14
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常用标记免疫酶及其底物
1 .标记酶的选择条件⑴ 活性高,分解底物的能力强。⑵ 特异性强,即作用于底物的专一性强。⑶ 与抗原抗体结合后仍保持酶的活性。⑷ 与底物作用可以显色。⑸ 纯度高
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半抗原――载体连接方法
1.半抗原与载体连接时,应选择合适的方法,结合方式的选择应考虑如下因素: 1)半抗原的溶解度和稳定性:在结合反应中应不导致半抗原活性的改变,同时也不能使载体变