-
平衡法选择高亲和力噬菌体抗体
[器材和试剂]● 链霉亲和素磁珠(DynabeadsM280,Dynal)● 磁性1.5ml试管架(Dynal)● 磷酸盐缓冲液(PBS)● 2%脱脂奶
-
创建重链改组噬菌体文库
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● 含有起始scFv的pHENl质粒或单链DNA(ssDNA)● Wlzard PCR纯化试剂盒(PrOli]egs.)
-
创建轻链改组噬菌体文库
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● 含有起始scFV基因的载体pHENl单链模板DNA(50ng/ul)● Geneclean试剂盒● Wlzard
-
人VL基因文库的构建
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● cFv基因文库单链模板DNA,制备自pHENl中的天然scFv文库(10ng/u1)● Gelleclean试剂盒(
-
XTT比色法
[基本原理]XTT比色法有Scudiero等首次采用,用于检测细胞增殖。XTT是异种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原成水溶性的棕色甲肷产物
-
MTT比色法
[基本原理]MTT法是Mosmann 1983年报道的,以后此方法得到了迅速发展并广泛应用于临床与科研研究。其原理是活细胞内线粒体脱氢酶能将四氮唑化合物(MTT
-
酶标记法检测细胞凋亡
[材料与试剂] (1)平衡缓冲液; (2)反应缓冲液; (3)TdT酶; (4)反应终止
-
噬斑的扩增
[材料和试剂] (1)恒温摇床 (2)培养管 (3)LB培养基 (4)甘油 [操作步骤] (1)以LB培养基稀释ER2537过夜培养物。1ml分装至培养管,每管
-
免疫荧光染色方法
(一)制片选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片,洗净后浸泡于无水乙醇和乙醚等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采
-
铁蛋白免疫电镜操作步骤
(一) 原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体 ,再以铁蛋白抗体 与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。(二)材料与试剂1. 马
-
放射免疫对流电泳
(一)原理将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时,沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影,就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线,
-
Affinity Chromatography
(一)原理 亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以
-
免疫电镜(Immune electron microscopy)简介
(一) 原理 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术
-
酶标对流免疫电泳
(一)原理 利用酶标记抗原(抗体)和待测抗体(抗原)在电场中向一定方向移动,在比例适当的地方形成沉淀线,通过酶作用底物而显色,指示沉淀线的存在。该法的敏感性大大
-
交叉电泳技术
(一)原理 交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法。先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90度角的方向