筛选多肽的试剂及配制

筛选多肽的试剂及配制   LB培养基： 胰蛋白胨   10g； 酵母提取物：5g； NaCl：5g 溶于去离子水，至1L，高压灭菌，室温保存。 IPTG/Xgal： 称取1.25g IPTG，1.0g Xgal，溶于二甲基甲酰胺，至总体积25ml，-20℃避光保存。 LB/IPTG/Xgal平板： 1L LB培养基+15g琼脂粉，高压灭菌，冷却至70℃以下，加入1ml IPTG/Xgal，立即铺板，4℃避光保存。 顶层琼脂糖凝胶： 胰蛋白胨 10g 酵母提取物5g NaCl 5g MgCl・6H2O 1g 琼脂糖7g 溶于适量去离子水中，至总体积为1L。高压灭菌，分装为50ml/份，室温保存，使用时于微波炉内融化。 2´M9盐： Na2HPO4  12g KH2PO4    6g NaCl      1g NH4Cl     2g 溶于适量去离子水中，至终体积为1L。 小型平板： 500ml 2´M9盐 500ml 3%琼脂粉 20ml 20%葡萄糖 2ml 1M MgSO4 0.1ml 1M CaCl2 1ml 硫胺素（10mg/ml） 在混合之前，将上述成分分别高压灭菌并冷却至70℃以下，葡萄糖和硫胺素采用过滤除菌。平板储存于4℃。 封闭缓冲液： 0.1M NaHCO3（pH 8.6） 5mg/ml BSA 0.02%NaN3 过滤除菌，储存于4℃。 TBS： 50mM Tris-HCl（pH 7.5） 150mM NaCl 高压灭菌，室温储存。 PEG/NaCl： 20%（w/v）聚乙醇-8000 2.5M NaCl 高压灭菌，室温储存。 碘化物缓冲液： 10mM Tris-HCl（pH 8.0） 1mM EDTA 4M NaCl 室温避光保存。 链亲和素储存液： 称取1.5mg 冻干链菌素溶于1ml的10mM 磷酸钠（pH 7.2），100mM NaCl，0.02%NaN3溶液。贮存于4℃或-20℃，避免反复冻融。