western blotting的一些细节-2

上样缓冲液的问题：   上样缓冲液配多少浓度双较合适，这个问题是很重要的。因为这里涉及到上样量的问题。 如果上样孔只能上样30ul。而样本中蛋白较少，要上样25ul才有可能做出蛋白条带。这个时候就要用到高倍上样缓冲液。以下是6倍缓冲液的配方：   6*SDS凝胶上样缓冲液：   300mM/L tris-HCl(pH6.8) 600mM/L DTT 12%SDS 0.6%溴酚蓝 60% 甘油   此外，提高上样量还有一个办法。就是在上样缓冲液和样品混合煮的时候开盖，这样可以使一部分水份蒸发，从而提高上样量。