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帮忙分析一下抗原与弗氏不完全佐剂乳化不好的

2025-06-06 免疫技术 加入收藏
我用两个注射器进行等量抗原与弗氏不完全佐剂的乳化,可是乳化了四个多小时后,滴在冰水里还是很快扩散,麻烦各位帮忙分析一下乳化失败的原因,多谢!弗氏佐剂是目前动物实

我用两个注射器进行等量抗原与弗氏不完全佐剂的乳化,可是乳化了四个多小时后,滴在冰水里还是很快扩散,麻烦各位帮忙分析一下乳化失败的原因,多谢!

弗氏佐剂是目前动物实验中最常用的佐剂,分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成,组分比为1~5:1,可根据需要而定,通常为2:1。不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2~20mg/ml)或死的结核分枝杆菌,即为完全弗氏佐剂。上述佐剂经高压灭菌后,低温保存备用。

  在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,制备成 "油包水"乳状液。佐剂和抗原体积比一般为1:1。佐剂与抗原乳化可按如下方法进行:

  (1) 研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。

  (2) 注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。

本法优点是容易做到无菌操作,适用于制备少量的抗原乳剂。 制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化完全,为合格的油包水剂。可以取弗式不完全佐剂滴在水里试试,看看是不是佐剂的问题!wo

我们常常用很细的匀浆器来乳化,很好用注意把水相推到油相,我试过,这样大概十几分钟就乳化好了,反过来可能怎么都不好(有两次我推反了足足2个小时我手都快抽筋了都不好),原理是油包水型的是水到大量的油中才行,反过来就成水包油了,在药剂书上有


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