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RNA pull-down详细实验步骤
1、磁珠准备(1)取3µg Biotin标记的RNA,加入适量Structure Buffer,使得RNA形成二级结构。然后将RNA 95℃加热2 min,冰浴
2025-02-08 10 -
RNA pull-down注意事项与常见问题
一、RNA pull-down实验注意事项1、实验前期准备(1)首先是样本的收集和处理,如果样本是细胞,要考虑细胞中该RNA的表达量,如果RNA含量较低,那提取
2025-02-08 10 -
RNA pull-down实验问题答疑
1、RNA pull-down的实验如何防止RNA降解?RNA pull-down实验的一大难点就是RNA本身易降解,所以过程中要禁止RNase,以防止降解。因
2025-02-08 9 -
DNA pull-dwon实验介绍
一、实验流程一般来说,该实验首先,需要针对待研究目的基因的调控区域设计并制备特异性探针(以脱硫生物素标记为主流);同时,制备细胞核提取物;将探针和核提取物共同孵
2025-02-08 7 -
DNA pulldown实验操作步骤
1.探针设计及标记①采用基因组DNA做模板,经PCR扩增启动子片段;②将其克隆至pMD-18T克隆载体,并测序鉴定成功;③使用PCR法或末端标记法标记探针;④标
2025-02-08 8 -
DNA pulldown实验问题答疑
问题一:DNA pull down的原理?DNA pull down的原理是先将含脱硫生物素的DNA pull down探针结合到链霉亲和素Beads上,再将D
2025-02-08 15 -
GST pulldown实验原理与介绍
GST pull-down实验---GST:谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferase)是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验
2025-02-08 11 -
GST pulldown实验操作步骤
一、GST-a融合蛋白的制备1、GST-a融合蛋白的表达(1)将目的蛋白与GST的重组质粒转化到BL21菌株中;(2)挑取单克隆到含有5mL LB培养基(加入5
2025-02-08 8 -
什么是耐药细胞株?
肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一,成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此,探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目
2025-02-08 11 -
耐药细胞株构建详细步骤步骤
1、细胞复苏(1)将ddH2O预温至37℃。(2)戴上手套和口罩帽子,从液氮罐中取出装有目的细胞的冻存管(内有1 mL细胞混合液),立即投入37℃ddH2O中,
2025-02-08 8 -
耐药细胞株构建注意事项
耐药细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的
2025-02-08 6 -
脓毒症动物模型介绍
脓毒症模型的制作方法主要有细菌攻击制模法、内毒素攻击制模法、腹膜炎攻击制模法、其他脏器攻击等方法,咱们来一个个看:1、细菌攻击制模法细菌攻击造模方法是在动物体内
2025-02-08 11 -
脓毒症模型构建操作步骤
一、实验准备水合氯醛、75%酒精、手术剪、眼科镊、手术缝合针、手术缝合线、10ml注射器二、脓毒症动物模型操作步骤1根据小鼠体重腹腔注射麻醉剂水合氯醛,待小鼠完
2025-02-08 11 -
非酒精性脂肪肝造模原理与方法
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种无酒精滥用的肝病综合征,包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬变。可从单纯性脂肪肝经非酒精性脂肪性肝炎(NAS
2025-02-08 6 -
非酒精性脂肪肝造模详细步骤
1、实验准备实验材料准备:SD大鼠40只,体重200~~220g,清洁级;猪油、鸡蛋黄自备;高脂造模饲料;普通饲料2、实验方法(1)动物分组及处理SD大鼠40只
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