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ELISA试剂盒选择与使用指南
一、ELISA试剂盒的选择1. 明确检测目标首先,明确你的实验目的是检测何种生物分子。不同的ELISA试剂盒针对的是不同的分析物,如肿瘤标志物、炎症因子、自身免
2025-01-16 15 -
ELISA实验与Western Blot的异同点解析:如何选择更适合实验方法?
ELISA实验与Western Blot的基本原理一、基本原理的共性ELISA和Western Blot的基本原理都基于免疫结合反应。即利用抗原与抗体的特异性结
2025-01-16 15 -
ELISA实验注意事项
一、实验前准备1. 试剂检查与配制①试剂检查:实验前务必对试剂盒进行仔细检查,包括生产日期、批号、有效期等,确保试剂盒在有效期内使用。②试剂配制:严格按照试剂盒
2025-01-16 11 -
ELISA实验常见问题解答
一、样本准备和处理1. 样本如何保存?样本的保存对实验结果至关重要。一般来说,在5天内检测的血清样本可放置于4C,若超过一周则需冻存于-20C或更低温度。样本在
2025-01-16 11 -
shRNA序列设计基因干扰原理
——shRNA:基因干扰的精准利器shRNA,即短发夹RNA,是一种人工合成的RNA分子,其独特之处在于能够形成特定的发夹结构,这一结构使得shRNA能够特异性
2025-01-16 15 -
shRNA序列设计的具体步骤是什么?
一、明确目标与需求在设计shRNA序列之前,首先需要明确你的研究目标:是抑制哪个基因的表达?这个基因在何种细胞或组织中发挥作用?明确目标后,你才能有针对性地设计
2025-01-16 17 -
探讨减少shRNA序列脱靶效应的方法
㈠shRNA脱靶效应:不容忽视的挑战脱靶效应,顾名思义,即shRNA在沉默目标基因的同时,意外地影响了非目标基因的表达。这种“误伤”不仅可能掩盖真实的生物学信号
2025-01-16 19 -
shRNA序列设计的关键因素
1. 靶点选择①特异性:选择的靶点序列应与目标基因的mRNA序列高度特异,避免与其他非目标基因序列有显著的同源性,以减少脱靶效应。②保守性:同时,靶点序列
2025-01-16 26 -
shRNA序列设计实战技巧:优化基因表达调控
一、靶点选择与评估㈠特异性评估:①选择与目标基因mRNA序列高度特异且避免与其他基因同源的靶点。②利用生物信息学工具(如BLAST)进行序列比对,评估靶点的特
2025-01-16 17 -
介绍一些常用的shRNA表达载体
1. 质粒载体质粒载体是最常见的shRNA表达载体之一,它们通常包含RNA聚合酶III型启动子(如U6或H1启动子),这些启动子能够驱动shRNA的转录。质粒载
2025-01-16 7 -
最新shRNA序列设计趋势与策略
一、shRNA序列设计原则①发夹结构:shRNA包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔,组成发夹结构。这种结构是shRNA发挥作用的基础。
2025-01-16 11 -
构建shRNA序列设计流程
一、目标基因选择与shRNA设计①明确目标基因:确定需要调控的目标基因及其在细胞或组织中的功能。②选择靶序列:利用在线工具(如RNAi Design T
2025-01-16 10 -
阐述siRNA和shRNA在细胞实验中的使用差异
1. 结构与构建方式siRNA:结构:siRNA是一种双链RNA分子,长度通常在21-23个核苷酸之间,其3'端常有两个游离的碱基。这种结构使得si
2025-01-16 21 -
分析siRNA和shRNA在细胞实验中可能遇到的问题及相应的解决方案
问题1:转染效率低分析:siRNA的转染效率受到多种因素的影响,包括细胞类型、转染方法、siRNA浓度等。解决方案:①选择合适的转染方法,如化学转染
2025-01-16 11 -
siRNA、shRNA 都是啥?
siRNA siRNA是一种双链RNA分子,通常由20-25个核苷酸组成。其主要功能是在RNA干扰(RNAi)过程中通过与目标mRNA互补结合并引导其降解,
2025-01-16 8