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如何构建siRNA表达载体?
siRNA表达载体构建可以:(1)作为后基因组时代基因功能分析的有力工具;(2)应用于基因组学、细胞信号传导通路分析;(3)用于药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法
2025-01-12 15 -
如何达到更好的siRNA转染效率?
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点:1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结
2025-01-12 11 -
细胞转染的方法有哪些?
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA
2025-01-12 6 -
RNA转染效率影响因素
1.转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA
2025-01-12 9 -
细胞转染实验的建议
1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或210^6-410
2025-01-12 9 -
肿瘤细胞的原代培养
由于不同人种、不同民族的遗传基因不同,所以对不同疾病, 特别是对复杂疾病的易感性、对各种药物的耐受性和对各种环境因子的反应也不同,建立国人肿瘤细胞株, 可为国人
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实验室小白篇:细胞培养的基本操作
(一)无菌操作细胞在体外生长,其生存环境发生了很大变化。首先,体外培养细胞缺乏抗感染能力,故应无菌操作,以最大限度地防止微生物污染。培养所用的一切物品、液体均应
2025-01-12 12 -
病毒感染的细胞与未感染的对照细胞相比,在相同浓度的嘌呤霉素(puromycin)处理下,病毒感染的细胞死亡更多的原因
这种现象可能由以下几个原因引起:病毒感染对细胞的影响:病毒感染(例如慢病毒载体的感染)会对细胞造成一定的压力,可能导致细胞的代谢、增殖状态和基因表达发生变化。即
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siRNA转染效率低的原因有哪些?
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实
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如何选择正确的方法进行细胞的支原体检测?
几种支原体检测方法,各有优缺点。各实验室可根据具体情况,选择不同的方法,或几种方法联合使用。1. 培养法为最为经济可靠的方法,但其实验周期较长,所以常用来进行对
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细胞RNA转染实验注意事项
1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,
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慢病毒感染后,细胞不生长怎么办
慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法:病毒滴度过高:原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。解决方法:降低病
2025-01-12 8 -
细胞转染实验易出现的问题
1.准备不足做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。
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纳米材料转染试剂(Entranster)优势研究
纳米材料转染试剂由纳米高分子聚合物组成,分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面 的负电荷,使DNA 分子由伸展结
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细胞转染效率重复性差的原因是什么?
转染效率重复性差:1. 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。2.细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。3.细胞传代
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