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细胞转染实验中易出现的问题
细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验中易出现
2025-01-11 10 -
怎么样做好siRNA细胞转染实验?
1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸
2025-01-11 10 -
体外培养细胞的一般性质(二)
体外培养细胞的功能表达(分化)由于体外细胞培养的过程是不断选择具有分裂增殖能力细胞群的过程,所以细胞群一直处于变化中。体外的细胞培养物逐渐会变为处于动态平衡的由
2025-01-11 13 -
转化细胞在软琼脂中的生长
恶性转化的细胞在许多方面不同于其相应的正常细胞,主要不同在于它们失去了接触抑制生长,获得永生性和在动物宿主体中形成肿瘤的能力。软琼脂培养可作为体外检测细胞转化和
2025-01-11 15 -
实验室小白篇:细胞培养用品及其准备
一、细胞培养瓶、培养皿和培养板目前,细胞培养已很少使用传统的玻璃制品,如玻璃卡氏培养瓶、玻璃离心管、玻璃试剂瓶,而多数使用一次性的塑料制培养瓶、塑料制离心管及塑
2025-01-11 11 -
电转效率受哪些因素影响?
电穿孔效率受以下几种因素的影响:外加电场的强度。电压过低,培养细胞质膜的改变不足以允许DNA 通过; 电压过高,细胞会受到不可逆的损伤。对于大多数哺乳动物细胞系
2025-01-11 13 -
如何能达到较高的细胞转染效率?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每
2025-01-11 6 -
改良的Boyden 小室法观察细胞的的运动性
该方法常用来检测白细胞和巨噬细胞的趋化性,后经改良用于肿瘤细胞运动性、侵袭性等的测定。Boyden 小室由上、下两个室组成,两室中间由带微孔的滤膜分隔,也可用鸡
2025-01-11 10 -
提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,
2025-01-11 6 -
慢病毒感染后,未能实现相关敲降的原因是什么?
慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释:慢病毒包装质量问题:病毒滴度较低,导致感染效率不高,可能无法有效转导目标细胞。病毒颗粒中
2025-01-11 16 -
实验室小白篇:细胞培养用的液体
一、细胞培养所需的培养液在细胞的研究和利用过程中,最主要的是要为细胞提供最适的生长条件,保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一,近乎呆板地坚守细
2025-01-11 19 -
RNA转染过程中细胞毒性大怎么办?
RNA转染时细胞毒性大可能的原因有:1.RNA与转染试剂比例不佳。建议进行预实验优化。2.细胞密度不佳。调整细胞密度。3.细胞污染。建议彻底清洁所有细胞培养相关
2025-01-11 9 -
人胚胎肺成纤维细胞的培养
成纤维细胞作为体外最易培养成功的正常细胞,用途广泛。但由于其有限的传代寿命,通常用于细胞衰老的研究,在肿瘤研究中,常常作为正常细胞对照,用于研究细胞恶性转化的条
2025-01-11 13 -
慢病毒感染细胞后,细胞长满48小时是否可以先传代,再等到72小时再喷霉素筛选吗
通常在进行慢病毒感染后,建议遵循以下操作步骤:感染后观察细胞状态:感染后一般在48-72小时内可以看到较为明显的表达,但是否开始筛选需要看细胞的状态和感染效率。
2025-01-11 9 -
电转染过程中易出现的问题
1. 不合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细
2025-01-11 11