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为什么entranster试剂可以进行有血清细胞转染?
使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。EntransterTM只浓缩包裹核酸不会将血
2025-01-09 11 -
悬浮细胞的siRNA转染实验步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例1.提前1天细胞种植悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某
2025-01-09 13 -
细胞培养的无菌技术
微生物无处不在,它们造成污染的可能性也处处存在。细胞培养成功操作最基本的要点是:任何与细胞接触的物品必须是无菌的或没有污染的。要解决培养过程中的污染问题是一件繁
2025-01-09 11 -
血清对于细胞转染效率有什么影响?
血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。另外,使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血
2025-01-09 7 -
细胞转染实验的不同方法
1.DEAE-葡聚糖。这是早在1965年出现的转染方法。带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体可以结合带负电的DNA分子,使得DNA复合物结合在带负
2025-01-09 16 -
提高细胞转染效率的要点
1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和D
2025-01-09 11 -
体外培养细胞的一般性质(一)
细胞的存活及生长具有贴壁依赖性绝大多数实体组织来源的细胞,在离开机体、于体外生存生长时,都具有贴壁依赖性,即以单层形式附着在培养瓶或培养皿表面的方式生长。如果无
2025-01-09 10 -
电转染实验时,DNA有什么要求?
使用Entranster-E电转染试剂进行电转染实验时,应使用高纯度、无菌和无污染的DNA进行电穿孔实验。质粒DNA要求无内毒素,OD值为1.8-2.0。
2025-01-09 7 -
siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想,常见的原因有:1. RNA与转染试剂比例不佳由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下
2025-01-09 7 -
细胞电转后,72小时铺板加药筛选是否可行
一般情况下,在细胞电转后进行72小时的培养再加药筛选是可以的。具体取决于你的实验设计和细胞类型。以下几点你可以考虑:细胞恢复时间:不同的细胞系在电转后需要不同的
2025-01-09 5 -
病毒感染细胞效率低怎么办?
病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用Envirus-LV,可以提高感染效率20-50倍。病毒感染细胞本来效率就
2025-01-09 8 -
细胞冻存的7个注意事项
方法:冻存液最好现配:按1:3:6(或1:2:7) 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态量好的细胞进
2025-01-09 7 -
怎样做好细胞电转染实验?
要想做好细胞的电转染实验,应注意以下几点:1. 选择合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低
2025-01-09 4 -
电转染实验中易出现的问题
1. 不合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形
2025-01-09 6 -
siRNA细胞转染过程中常见问题及解答
问:siRNA导入细胞有哪些方法,哪种最好?答:siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依
2025-01-09 8