-
什么是彗星实验?
彗星实验是一种有效评估DNA损伤的方法。其原理是器官或组织经处理(如辐射、重金属等)后,细胞中的DNA发生单链或双链断裂,经细胞及其核膜裂解后,DNA解旋,在电
2025-02-10 23 -
彗星实验/单细胞凝胶电泳实验操作步骤
彗星实验第一步:分离制备单细胞悬液:(1)体外培养的细胞株:用胰酶消化,最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液,细胞要计数,具体的量我前边已经说过。(2)体内脏器细胞
2025-02-10 21 -
彗星实验/单细胞凝胶电泳实验注意事项
1、细胞一定要消化成单个的,如果待测的细胞是悬浮生长的,或者形状是圆形的,可以直接用细胞刮收细胞做,如果细胞是非圆形的,例如成纤维细胞等,一定要用胰
2025-02-10 17 -
彗星实验操作常见问题答疑
问题一:彗星玻片可以重复使用吗?答:不能。彗星玻片表面经过了特殊处理,一旦整个玻片经历了变性,电泳和洗涤的操作步骤,就不能再重复使用了。问题二:可以用常规载玻片
2025-02-10 26 -
细胞衰老的介绍与研究意义是什么?
首先,什么是细胞衰老呢?细胞衰老(cell aging)是指细胞在执行生命活动过程中,随着时间的推移,细胞增殖与分化能力和生理功能逐渐发生衰退的变化过程。细胞的
2025-02-10 19 -
细胞衰老的检测方法
一、β-半乳糖苷酶活性测定1995年,Dimiri等发现体外培养二倍体成纤维细胞在培养基pH值为6时,其β-半乳糖苷酶染色的阳性率随代龄增加而逐渐上调,他们把这
2025-02-10 24 -
贴壁细胞、悬浮细胞、组织切片衰老实验操作步骤
首先是贴壁细胞衰老检测的实验步骤:1、吸除培养基,用PBS(或试剂盒里的细胞清洗液)洗涤细胞3遍。2、吸取清洗液,加入固定液室温固定细胞15min。3、吸去固定
2025-02-10 22 -
什么是实时荧光定量PCR?
实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量
2025-02-10 18 -
荧光定量PCR实验操作步骤
荧光定量PCR第一步:RNA提取1、首先进行不同样本的预处理:(1)组织样本:迅速将新鲜的组织切成合适的大小,在液氮中充分研磨后加裂解液裂解,或直接加入裂解液后
2025-02-10 28 -
荧光定量PCR结果分析解读
1、基线基线是指实时PCR反应的基线是指在PCR的初始循环期间的信号水平,通常是3至15的循环之间,此时荧光信号几乎没有变化。此时低信号可以认为是背景或反应的“
2025-02-10 22 -
荧光定量PCR实操注意事项
1、荧光定量PCR操作注意点:(1)实验室注意分区:试剂准备间,样本处理间,PCR室,电泳间要有明确区分,各房间实验室的实验服不得混用;(2)试剂准备间及样本处
2025-02-10 26 -
实时荧光定量PCR常见问题及解决方法
1、RNA得率低原因1:样品裂解不完全解决:适当选择起始材料的量,加入合适体积的裂解液。原因2:匀浆不充分解决:减少材料的数量;根据材料类型选择合适匀浆方法;组
2025-02-10 25 -
实时荧光定量PCR实验技术答疑
1、实时荧光定量技术是什么?有什么用? 实时荧光定量PCR技术(Real-time qPCR),其基本原理是在常规PCR基础上添加荧光染料或荧光染料探针,
2025-02-10 14 -
什么是SNP/单核苷酸多态性?
单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人
2025-02-10 18 -
SNP/单核苷酸多态性检测最常用的三种方法
1、Taqman探针法(定性)针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告
2025-02-10 45