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细胞冷冻与复苏操作注意事项
一、细胞冻存注意事项1、DMSO配制的时候会放热,一定要等冻存液冷却后使用,避免灼伤细胞;2、细胞离心后尽量吸干净上清液,减少培养基残留,避免稀释冻存液;3、不
2025-02-10 14 -
细胞冻存与复苏问题汇总大全
问题一:细胞冻存为什么要添加保护剂?细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术,细胞在不加任何保护剂的情况下冷冻,细胞内外的水分会很快形
2025-02-10 15 -
细胞培养基的理化性质和基本成分
细胞在培养基中,不仅要能够存活,还要分裂增殖,因此合适的渗透压,PH值、温度等理化性质是细胞培养基必须具备的前提条件,咱们一个一个看:1、PH值大多数动物细胞的
2025-02-10 21 -
细胞操作的无菌环境与操作要点
一、细胞的无菌操作环境在细胞培养的过程中,防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。无菌技术就像是一道屏障很大程度上保护细胞不受环境微生物的污染。无菌环境的基本要
2025-02-10 11 -
什么是细胞划痕实验?
细胞划痕实验是测定细胞迁移运动与修复能力的常用方法,类似体外伤口愈合模型,故又称伤口愈合法。细胞划痕实验的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上
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细胞划痕实验操作详细步骤
一、细胞划痕实验Culture Insert方法操作步骤1、准备细胞,培养液,culture lnsert。2、如图,将细胞接种于Dish中间的Insert,细
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细胞划痕实验操作注意事项
细胞划痕实验是检测细胞迁移运动中一种性价比较高的体外研究方法。其基本原理:当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,这个区域称之为“划
2025-02-10 16 -
细胞划痕实验操作问题答疑
问题一:细胞划痕实验为什么这么重要?答:因为细胞划痕实验是观察细胞迁移活动的重要技术手段,而且简单快捷、经济实惠(划重点!!!)。细胞迁移参与到很多的如免疫、炎
2025-02-10 11 -
Tunel染色实验原理与步骤详解
TUNEL染色是检测细胞凋亡染色的常见方法,其原理是细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电
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Tunel染色实操注意事项
1、Tunel检测固定注意事项(1)固定液建议使用4%的多聚甲醛(PBS)进行固定,不建议选用乙醇和甲醇,也不能选用甲醛替代,因为市面上购买得到的甲醛大多含有甲
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Tunel染色实验的常见问题与解决方法
问题一、荧光信号弱或没有荧光信号原因1:样本处理不当(1)样本切片太厚。建议适当将切片切薄一点,便于染色。(2)脱蜡和水化不充分。建议脱蜡先60ºC 20 mi
2025-02-10 17 -
什么是酵母双杂系统?
酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质分别克隆(融合)到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域(DNA-BD)和转录激活域(AD)上,构建成
2025-02-10 13 -
酵母双杂详细操作步骤
一、构建重组Activation Domain(AD)融合的重组质粒(pGADT7载体)以及Binding Domain(BD)融合的重组质粒(pGBKT7载体
2025-02-10 18 -
酵母双杂实验注意事项
1、如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办?在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1mL的SD/–Trp,接着
2025-02-10 22 -
酵母双杂交常见问题及解决方法上
问题一:灭菌后酵母培养基颜色变成棕褐色怎么办?SD系列的培养基预混了葡萄糖,在灭菌过程中由于灭菌时间较长,或者灭菌后在高温条件下长时间放置,引起培养基中葡萄糖碳
2025-02-10 21