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细胞电转染实验效率不理想的原因
1. 不合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成
2025-01-12 23 -
细胞电转染实验注意事项
选择合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系
2025-01-12 16 -
DEAE-葡聚糖介导的转染:提高细胞活力的方案
与之前文章中介绍的DEAE-葡聚糖方法相反,此替方案采用较低浓度的DEAE-葡聚糖( 250μg/mL) ,与细胞作用的时间较长(达8h) 。尽管不如使用高浓度
2025-01-12 15 -
如何构建siRNA表达载体?
siRNA表达载体构建可以:(1)作为后基因组时代基因功能分析的有力工具;(2)应用于基因组学、细胞信号传导通路分析;(3)用于药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法
2025-01-12 24 -
如何达到更好的siRNA转染效率?
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点:1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结
2025-01-12 18 -
细胞转染的方法有哪些?
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA
2025-01-12 16 -
RNA转染效率影响因素
1.转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA
2025-01-12 20 -
细胞转染实验的建议
1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或210^6-410
2025-01-12 18 -
肿瘤细胞的原代培养
由于不同人种、不同民族的遗传基因不同,所以对不同疾病, 特别是对复杂疾病的易感性、对各种药物的耐受性和对各种环境因子的反应也不同,建立国人肿瘤细胞株, 可为国人
2025-01-12 18 -
实验室小白篇:细胞培养的基本操作
(一)无菌操作细胞在体外生长,其生存环境发生了很大变化。首先,体外培养细胞缺乏抗感染能力,故应无菌操作,以最大限度地防止微生物污染。培养所用的一切物品、液体均应
2025-01-12 19 -
病毒感染的细胞与未感染的对照细胞相比,在相同浓度的嘌呤霉素(puromycin)处理下,病毒感染的细胞死亡更多的原因
这种现象可能由以下几个原因引起:病毒感染对细胞的影响:病毒感染(例如慢病毒载体的感染)会对细胞造成一定的压力,可能导致细胞的代谢、增殖状态和基因表达发生变化。即
2025-01-12 23 -
siRNA转染效率低的原因有哪些?
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实
2025-01-12 17 -
如何选择正确的方法进行细胞的支原体检测?
几种支原体检测方法,各有优缺点。各实验室可根据具体情况,选择不同的方法,或几种方法联合使用。1. 培养法为最为经济可靠的方法,但其实验周期较长,所以常用来进行对
2025-01-12 22 -
细胞RNA转染实验注意事项
1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,
2025-01-12 23 -
慢病毒感染后,细胞不生长怎么办
慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。以下是一些常见的原因和解决方法:病毒滴度过高:原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。解决方法:降低病
2025-01-12 18