-
细胞转染实验易出现的问题
1.准备不足做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。
2025-01-12 14 -
纳米材料转染试剂(Entranster)优势研究
纳米材料转染试剂由纳米高分子聚合物组成,分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面 的负电荷,使DNA 分子由伸展结
2025-01-12 13 -
细胞转染效率重复性差的原因是什么?
转染效率重复性差:1. 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。2.细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。3.细胞传代
2025-01-12 20 -
常用的细胞株
持续传代的细胞株有更高的生长速率、克隆效率、成瘤率和更多的染色体组型。持续传代细胞株经常被改造成所需的独特表型。细胞株分化度越高,它的生长也就越慢。常用的细胞株
2025-01-12 15 -
如何上调或下调特定的miRNA?
miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达。最近的研究表明它们影响了约三成的基因。miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点。
2025-01-12 24 -
电转染实验,如何设置正确的siRNA实验对照组?
1.设置空白对照组,检验细胞生长状态。2.设置阴性对照组,无血清培养基 + Entranster-E 电转染试剂 + 阴性siRNA。3.设置阳性对照组,无血清
2025-01-12 17 -
细胞转染实验方法有哪些?
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA
2025-01-12 10 -
细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和D
2025-01-12 11 -
影响RNA转染的因素
转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大
2025-01-12 22 -
病毒感染细胞实验整体流程
目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺
2025-01-12 15 -
如何判断细胞是否被污染?
发生污染,既耽误时间又是一个灾难,熟练的无菌操作能避免许多问题,但早期检测污染是一种可以预警的方法。对于培养箱中的每瓶细胞都要注意观察,要养成习惯,每次打开培养
2025-01-11 27 -
细胞的冷冻和储存
细胞生长时的表型会发生改变或漂变,所以细胞必须计数,计数后应马上冻存。冷冻细胞前检查冷冻细胞所需试剂和器具是否备齐。确认有无菌的可用于冷冻的冻存管 。确认液氮罐
2025-01-11 17 -
悬浮细胞的分瓶操作步骤
悬浮细胞的分瓶轻轻的摇匀培养瓶中的细胞培养物,吸出1 ml 到微量离心管中。对细胞进行计数,同时观察细胞状态。计算出稀释倍数,决定种子液的量。吸出适量的细胞到新
2025-01-11 16 -
siRNA转染后出现细胞死亡是什么原因?
转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择
2025-01-11 14 -
磷酸钙-DNA共沉淀法的原理和步骤
前些时间有微友在平台上咨询细胞转染的事项,并对一篇博客文章《为什么磷酸钙转染并不稳定?为什么磷酸钙转染并不经济?》比较感兴趣。在这里,对这位微友的疑惑进行更加全
2025-01-11 18