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SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法—蛋白质的分子量测定
【实验目的】1.掌握SDS—聚丙烯酰胺电泳法的原理。2.学会用此种方法测定蛋白质的分子量。【实验原理】SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是对蛋白质进
2024-12-07 20 -
聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳
【实验目的】1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术，用于分离蛋白质。【实验原理】聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为
2024-12-07 20 -
SDS-PAGE常见问题分析
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响？在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液
2024-12-07 24 -
双向电泳各步骤注意事项
1. 总的策略① 化学试剂纯度要高，至少是分析级，目前国产试剂达不到纯度要求② 使用去离子水(电导<2uS)③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制④
2024-12-07 17 -
蛋白等电聚焦凝胶电泳技术
1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体
2024-12-07 16 -
聚丙烯酰胺凝胶选择指导
Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶，包括不同的成分，百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度，缓冲系统，上样孔格式以及胶的厚度，对于获得最
2024-12-07 15 -
实验技巧：SDS－PAGE 电泳常见问题及指南
Q：SDS－PAGE 电泳的基本原理？A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS 会与变性的多肽，并使蛋白
2024-12-07 16 -
SDS-PAGE原理
SDS电泳技术首先在1967年由Shapiro建立，1969年由Weber和Osborn进一步完善。当在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS后，则蛋白质分子
2024-12-07 24 -
等电聚焦
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同的蛋白质即移动到或聚焦
2024-12-07 21 -
电泳概述
电泳是在溶剂中通过电场转移带电分子，任何带电的离子或者基团放置在电场中都将会迁移。除非在它们的等电点，大多数生物聚合物在任何pH值时都带有净电荷，它们将会以与电
2024-12-07 20 -
聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE胶的配制
各种浓度PAGE胶的配制（DNA电泳用）50ml体系：丙烯酰胺有效分离（bp)二甲苯青溴酚蓝丙烯酰胺30%（ml）10TBE（ml)ddH2O（ml）TEMED
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固相pH梯度等电聚焦分析讨论
固相pH梯度的优缺点固相pH梯度可窄至pH0.1的范围，因此分辨率极高，可达0.001pH；pH梯度稳定，不漂移；灵活性大，可随意选择pH梯度和斜率；重复性好；
2024-12-07 16 -
SDS-PAGE电泳过程中常见问题以及解决方法
几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS－PAGE电泳技术，关于
2024-12-07 22 -
SDS-PAGE常用参数
聚丙烯酰胺的特性，包括机械性能，弹性，透明度，孔径大小取决于T，C，T是两个单体(单体丙烯酰胺和N-N’-甲叉双丙烯酰胺)的总百分浓度，C是与总浓度有关的交联
2024-12-07 13 -
SDS-PAGE胶的干燥
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽
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