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PCR技术(十七):用PCR扩增cDNA库中的特异序列
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库,然后用抗体或DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因,但建立和筛 选CDNA库
2024-11-18 37 -
微量和特殊标本DNA PCR反应模板的制备
一、血斑标本操作方法1. 将血斑剪碎,置于试管中;2. 加1.8ml TES液(含0.15mol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl,pH7.5,
2024-11-18 41 -
real time PCR primers-Real-Time PCR
Hi everyone, I'll start doing rt-pcr using sybr green chemistry and already
2024-11-18 29 -
PCR Protocol for PCR-Mediated Gene Disruption
Procedure1. Set up the following PCR tube:5 μl of 10X Taq Buffer5 μl of 25 mM Mg
2024-11-18 19 -
PCR技术系列二:PCR反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量。模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基 本技能
2024-11-18 48 -
如何设计引物(二)
Nucleotides:Stocks of nucleotides for PCR (or other procedure) are NEARLY ALWAYS
2024-11-18 43 -
PCR反应体系的污染的对策
PCR可从痕量的DNA扩增出大量的DNA产物,由于它的高度敏感性,使PCR也特别容易受到污染。如果一对引物多次使用或以靶序列扩增产物的有无作为诊断的标准,那么必
2024-11-18 22 -
PCR[polymerase chain reaction]技术总论(图)
多聚酶链式反应(polymerase chain reaction)简称PCR技术,是80年代中期发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术。此法操作简便, 可
2024-11-18 41 -
PCR Cloning Considerations
Nature of the InsertThe cloning of PCR-amplified fragments into a linear vector
2024-11-18 35 -
AluPCR:用重复序列引物
AluPCR:用重复序列引物扩增来源复杂的人DNA 引言 聚合酶链反应PCR使不同来源的特异核酸片段的分离及分析发生了革命,但应用PCR分 离,分析特定DNA
2024-11-18 51 -
Standard PCR Protocol
Recommended Reagent Concentrations:Primers: 0.2 - 1.0 uM Nucleotides: 50 - 200
2024-11-18 27 -
PCR技术系列十五:个体配子DNA序列的PCR分析
高等生物遗传图谱的构建依赖于选择性杂交后代的分析或者通过家系分析法来计 算连锁关系。对人类而言仅后者是可行的。使用长度多态性限制片段(RFLPS)在构 建人连锁
2024-11-18 22 -
Degenerate PCR--简并PCR
The identification of novel members of gene families by PCR using degenerate pri
2024-11-18 18 -
PCR产物克隆方法
平端连接通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3
2024-11-18 23 -
扩增较大片段DNA的PCR方法
扩增较大片段DNA 的PCR 方法 一般PCR 方法在扩增大片段DNA 时的局限性: 通常所用的PCR 方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段
2024-11-18 43