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PCR实验技巧
增加PCR的特异性： 1. prime理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件 a. 足够长,18-24bp,以保证特异性
2024-11-13 22 -
直接从PCR产物回收纯化DNA (Promega 公司试剂盒)
1)直接加90-100μl纯化缓冲液于1.5ml离心管，再加入30～300μl PCR反应物，Vortex混合； 2)加入1ml树脂轻轻Vortex 3次，每次
2024-11-13 27 -
PCR 引物设计的原则和要点
引物设计有3 条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA 聚合反应。
2024-11-13 23 -
定 量 PCR 技 术 简 介
聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸扩增的有效工具，由于其灵敏、特异、快速等优点，在医学上已广泛应用与病毒、细
2024-11-13 20 -
Methylated CpG Island Amplification
Methylated CpG Island AmplificationProtocol written by Minoru Toyota2. Materials
2024-11-13 17 -
引物合成介绍
1. 引物是如何合成的？ 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。 DNA 合成仪有很多种 , 主要都是由 ABI/PE 公司生产，无论采用什么机器合成，合成的
2024-11-13 31 -
Single Primer (Semi-Random) PCR
DescriptionSingle primer PCR allows amplification from known to unknown regions
2024-11-13 21 -
PCR Additives
A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the y
2024-11-13 21 -
内切酶PCR反应中的活性
酶切反应条件如下：在20 µl PCR产物混合体系中加入5U的内切酶，按相应的反应温度温育1小时。通常20 µl PCR产物体系中含有1 µg底物DNA，1单位
2024-11-13 17 -
Standard PCR reaction
Steps for Standard PCR Reaction Design primers. In general, primers should have
2024-11-13 24 -
SSCP原理
SSCP原理及特点 日本Orita等研究发现，单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象，这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的，当有一个碱基发生
2024-11-13 28 -
质粒的大量制备
Plasmid Mini and Maxi Prep Methods (Gimila Lab) ・ Maxi-preps and all me
2024-11-13 20 -
增加RT-PCR灵敏度
分离高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。RNA的质量决定了你能够转录到c
2024-11-13 21 -
PCR-SSCP
一. 样品的制备1. 设计引物。用Oliga6.0对目的基因进行分析，设定引物，引物长度18-21个碱基，扩增片段以200-300bp最为合适。2. PCR扩
2024-11-13 27 -
原位PCR
About in situ PCR (Applied Biosystems) Basic information about in situ PCR and i
2024-11-13 18
