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引物设计重点考虑因素、设计技巧及引物设计软件推荐
我最近合成了几十对引物,,在实战中多多少少有些心得,拿出来给大家分享。我感觉想把引物合成的比较好,除了前引物和后引物的Tm不能相差太大,我们还要重点考虑以下因素
2024-11-12 28 -
Real-Time or Kinetic PCR
The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument, the Applied B
2024-11-12 19 -
RT-PCR PROTOCOL
RT-PCR PROTOCOL材料与方法…………………………………………………………1 .材料 ………………………………………………………1.1 供试用组织
2024-11-12 21 -
PCR简介及污染的处理
PCR技术简介前言一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用
2024-11-12 21 -
Degenerate PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major
2024-11-12 16 -
PCR引物设计的11条黄金法则
1. 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNA
2024-11-12 21 -
定 量 P C R
定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量绝对定量, 手工操作自动化检测
2024-11-12 34 -
噬菌体展示抗体库构建目的基因的获得PCR引物的设计
利用PCR技术扩增抗体VH和VL基因,所获得的产物需要满足以下两个要求:首先,得到的产物必需是正确的目的基因,要有可靠性;其次,要获得尽可能多种类目的基因,即有
2024-11-12 20 -
半定量RT-PCR (Semi-Quantitative RT-PCR )
RT-PCR AnalysisSolutions10X RT Buffer10X PCR Buffer100 mM Tris pH 9.0500 mM KCl1
2024-11-12 20 -
引物合成及各种问题总结
1.引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,
2024-11-12 28 -
PCR引物设计原则之个人心得篇
PCR的第一步就是引物设计。引物设计的好坏,直接影响了PCR的结果,因此这一步很关键。成功的PCR反应既要高效,又要特异性扩增产物。目前可以使用的引物设计软件很
2024-11-12 20 -
Semi-Quantitative RTPCR
The RT-PCR method can be used not only to detect specific mRNAs but also to semi
2024-11-12 17 -
PT-PCR
Reaction Mix:It is again convenient to make up a master mix to be aliquotted out
2024-11-12 20 -
PCR技术:PCR产物测序
PCR技术代替了为测序而反复进行的分子克隆和模板制备步骤。PCR技术与自动测 序技术相结合后,它将成为一种最快、最有效的测定核苷权序列的方法。本章主要综 述各种
2024-11-12 27 -
聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用
聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用第一节 概述 聚合酶链反应或多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR),又称无细胞克隆
2024-11-12 32