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卵清蛋白分离提取
一、实验目的与原理 鸡卵粘蛋白存在于鸡蛋清中,对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,高纯度的鸡卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比为1:1。鸡卵粘蛋白在中性或酸性溶液中对
2024-12-04 36 -
亲和层析纯化胰酶
一、实验目的与原理 生物大分子化合物的重要特征之一是具有与某些相对应的分子通过次级键或共价键专一结合的能力即亲和力。例如酶与抑制剂之间,抗原与抗体之间,结合的双
2024-12-04 29 -
细胞裂解液的制备
一、试剂准备 1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1%
2024-12-04 38 -
蛋白质组技术
一、研究材料 1995年,Wasinger等在第一篇蛋白质组研究文章中研究的对象为目前已知最小但能自主复制的原核微生物——支原体Mycoplasma genit
2024-12-04 21 -
等电聚焦电泳(IEF)分离蛋白及测定蛋白质等电点
一、原理 等电点聚焦(IEF)是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展,等电聚焦是在稳定的pH梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。 在电场中充有两性
2024-12-04 32 -
多酚氧化酶(PPO)的分离提取
一、原理与目的 多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶,植物受到机械损伤和病菌侵染后,PPO催化酚与O2氧化形成醌,是组织形成褐变,以便损伤恢复,防止或
2024-12-04 25 -
胰酶分离提取
一、原理与目的 提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后
2024-12-04 34 -
单细胞凝胶电泳标准操作规程(本室SOP)
原理: 在细胞核中,DNA是环状附着在核基质上,细胞裂解过程中,核基质被溶解、抽提,DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口,则使DNA超螺旋变的松弛,
2024-12-04 31 -
功能蛋白质组学研究的有力工具:Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统
原理和应用: Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标
2024-12-04 27 -
聚乙二醇修饰反应类型
在20种构成蛋白质的常见氨基酸中,只有具有极性的氨基酸残基的侧链基团才能够进行化学修饰。常用的反应氨基酸包括赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、
2024-12-04 18 -
蛋白质组分析中的初步分离
在分析质谱产生的二维图谱上的蛋白质斑点时,看起来似乎只有通常含量比较高的蛋白质(编码偏倚指数大于0.2)才能彻底被鉴定出来。因而,二维胶上的斑点数量不能代表可以
2024-12-04 25 -
使用胶做western blot的方法
在经典的Western Blot的世界里,蛋白电泳―转膜―封闭―抗体―显色这个五步骤环环相扣,构成WB完整过程,就象砌积木一样,少了前面一步的基础后面的就砌不上
2024-12-04 24 -
蔗 糖 酶 的 提 取
摘要 随着分子生物学的发展,不论对酶分子本身作用机制的研究以及其他研究,越来越需要纯度很高的酶制剂,这就要求我们熟悉酶提纯的一般操作及酶的提纯及活力测定等重要的
2024-12-04 35 -
Western bloting 综述
摘要:本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述,Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分
2024-12-04 27 -
2套多肽固相合成装置的设计与应用
摘要:根据多肽固相合成的基本原理,设计了2套手工合成装置,介绍了每套装置的操作方法,并阐明了各种装置的优缺点和应用范围。
2024-12-04 27