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DEAE-葡聚糖介导的高效率转染实验
材料与仪器指数生长的哺乳动物细胞二磷酸氯喹 DEAE-葡聚糖磷酸盐缓冲液 含葡萄糖的 Tris-缓冲盐溶液 质粒 DNA 细胞生长培养基组织培养皿步骤材料缓冲液
2024-06-03 20 -
电穿孔转染 DNA 实验
材料与仪器指数生长的哺乳动物细胞培养液Giemsa 染液 甲醇 磷酸盐缓冲液 丁酸钠 载体 DNA 细胞生长培养基组织培养皿 基因脉冲器 II 电穿孔设备与电转
2024-06-03 28 -
生物粒子介导的 DNA 转染实验
材料与仪器CaCl2 乙醇 甘油 亚精胺 质粒DNA 细胞生长培养基基因枪 金或钨粒子 镜头纸 微量离心管 需转染的细胞或组织步骤材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液
2024-06-03 21 -
基因组文库的扩增实验
原理通过平板培养可对重组噬菌体文库进行扩增,平板培养的原种可直接来源于本方案所述的包装混合物。但只要可能,该扩增过程可被省略,而感兴趣的 DNA 序列可从原始文
2024-06-03 23 -
利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验
材料与仪器指数生长的哺乳动物细胞DMSO(30%) 含血清培养基 Giemsa 染液 甲醇 Polybrene 丁酸钠 要转染的 DNA最低基础培养基 组织培养
2024-06-03 26 -
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
原理对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可
2024-06-03 31 -
DNA 酶 I 足迹法对 DNA 上的蛋白质结合位点作图实验
材料与仪器新鲜组织、培养的细胞、来自细胞或组织的蛋白成分细胞匀浆缓冲液 细胞重悬缓冲液 细胞淋洗缓冲液 乙醇 Ficoll 400 甲酰胺染色液 MgCl2 C
2024-06-03 21 -
DNA 结合蛋白的凝胶阻滞分析实验
材料与仪器作为对照的核提取物或蛋白组分 核提取物或蛋白组分Ficoll 400 聚乙烯醇 蔗糖染色液 10X Tris-氨基乙酸或Tris-硼酸-EDTA(TB
2024-06-01 21 -
DNA 酶 I 超敏感位点作图
材料与仪器真核细胞缓冲液 A EDTA 乙醇 裂解缓冲液 磷酸盐缓冲液 台盼蓝染料 DNA 酶 I 稀释缓冲液 DNA 酶 I 溶液 蛋白酶 K 溶液 RNA
2024-06-01 25 -
连缀转录分析实验
原理离心机和转头,沸腾的水浴锅, Dounce 匀浆器,晶型塑料或超明亮型吊桶式离心管,聚丙烯管,刀片,预设到 30C 的振荡水浴,预设到 4C 和 65C 的
2024-06-01 22 -
薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验
材料与仪器用携带感兴趣 DNA 的 pCAT 载体转染的哺乳动物培养细胞CAT 反应混合物 1 乙基乙酸 裂解缓冲液 不含钙盐和镁盐的磷酸盐缓冲液 薄层层析(T
2024-06-01 25 -
哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定实验
原理萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶,同时在所有的化学发光反应中,它的光产物具有最高的量子
2024-06-01 24 -
四环素作为可诱导基因表达的调控物实验
材料与仪器pSV2-His 带有靶基因开放阅读框的 pTet-Splice 带有报道基因的 pTet-Spliqe NIH-3T3 细胞 pPGKPuro 可诱
2024-06-01 25 -
通过杂交筛选未扩增的黏粒文库(滤膜影印)
原理经黏粒转化的稠密细菌菌落可通过杂交的方法筛选,该方法源于质粒转化菌落的大规模筛选(Hanahan and Meselon 1980)。材料与仪器步骤一、材料
2024-06-01 23 -
黏粒文库的扩增和贮存(在液体培养基内扩增)
原理不要过度扩增黏粒文库,因为这样会不可避免地引起原基因组的失真。生长较快的克隆会过度呈现,不稳定的克隆会发生重排,而生长慢的克隆可能会从文库中完全消失。材料与
2024-06-01 38