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通过免疫共沉淀确定结合蛋白实验
材料与仪器培养基中生长的适宜细胞株乙腈 考马斯亮蓝 R-250 EBC 裂解缓冲液 NETN 磷酸盐缓冲溶液 SDS 凝胶加样缓冲液 三氟乙酸 胰蛋白酶 胰蛋白
2024-06-01 29 -
GFP 和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验
材料与仪器进行转染的细胞株 按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞N-二羟乙基甘氨酸 消化缓冲液 N N-二甲基甲酰胺 磷酸钠 磷酸盐缓冲溶液 TE
2024-06-01 31 -
利用 BIAcore 分析相互作用的蛋白质
原理Biacore是基于表面等离子体共振(SPR)技术来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用,无需任何标记物。表面等离子体共振(surface plasmo
2024-06-01 30 -
细菌人工染色体的应用
原理细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大肠杆菌致育因子 (fertility, F)为基础的合成
2024-06-01 33 -
小量培养物中分离 BAC DNA
原理小量 BAC DNA 是从 5 ml BAC 转化细胞培养物中制备的。DNA 的制备采用碱裂解法。BAC DNA 的产量可达 0.1~0.4 μg,足够用
2024-06-01 26 -
大量培养物中分离 BAC DNA
原理BAC 重组子的精细分析,包括详细的限制酶切图谱、DNA 测序或亚克隆,所需 DNA 量都超过小量制备所能提供的量。本方案的制备流程适用于重组 BAC 的大
2024-06-01 32 -
酵母人工染色体的应用
原理直到 20 世纪 80 年代中期,尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前,如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究,
2024-06-01 22 -
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化寡核苷酸实验
材料与仪器无菌的过滤水 乙腈 乙酸铵 正丁醇 不含指示染料的甲酰胺凝胶加样缓冲液 甲酰胺指示染料混合液 甲醇:水溶液 寡核苷酸洗脱缓冲液 TE 溶液 合成寡核苷
2024-06-01 24 -
乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器乙酸铵 乙醇 TE 放射性标记的寡核苷酸 纯化的原料步骤材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。乙酸铵(1mol/L)乙醇TE(pH7.6)核酸和寡核苷
2024-06-01 34 -
大小排阻层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器氯仿 EDTA 乙醇 酚:氯仿 乙酸钠 TE Tris-Cl Tris-SDS 层析缓冲液 放射性标记的寡核苷酸 纯化的原料凝胶过滤树脂 破璃棉 巴斯
2024-06-01 26 -
用Sep-Pak C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器乙腈 碳酸氢铵 TE 溶液 放射性标记寡核苷酸离心干燥机 微量离心管放于管架或收集器 Sep-Pak 经典层析柱 注射器步骤材料溶液和缓冲液稀释贮存液
2024-06-01 26 -
用大肠杆菌 Klenow 片段标记合成的寡核苷酸实验
材料与仪器甲酰胺加样缓冲液 大肠杆菌 DNA 聚合酶 IKlenow 片段 变性聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 寡核苷酸模板 [α-32P]dNTP磷荧光粘贴标签
2024-06-01 31 -
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
材料与仪器寡核苷酸杂交液 寡核苷酸预杂交液 SSC 或 SSPE TEAC1 洗涤液 TMAC1或 TEACl TMAC1 洗涤液 核酸和寡核苷酸 放射性标记的
2024-06-01 25 -
解链温度的实验测定
材料与仪器变性液 中和缓冲液 寡核苷酸预杂交液 酚: 氯仿 乙酸钠 SSC 酶切双链靶 DNA 的适当的限制酶 对照 DNA 靶 DNA 寡核苷酸探针煮沸水浴装
2024-06-01 34 -
真核表达文库的构建与筛选实验
材料与仪器宿主细胞 质粒或λ噬菌体表达载体 包装提取物 电转化感受态大肠杆菌限制性内切核酸酶缓冲液 限制性内切核酸酶 通过 poly(A)+富集的 mRNA c
2024-06-01 22