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外显子捕获与扩增
材料与仪器大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3 COS-7 细胞 载体 pBluescriptⅡ 大肠杆菌 DH5αpSPL3 多克隆位点图谱 限制性内切
2024-06-01 33 -
用大片段基因组 DNA 克隆直接筛选 cDNA实验
材料与仪器扩增缓冲液 DNA 聚合酶 DNaseI 限制性内切核酸酶 ATP 链霉亲和素-磁珠结合缓冲液 T4DNA 连接酶 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶
2024-06-01 28 -
琼脂糖凝胶中DNA的回收（DEAE-纤维素膜电泳）
原理从琼脂糖凝胶回收 DNA 是通过电泳至带正电荷的 DEAE-纤维素膜上完成的。这种方法首先利用适当浓度的琼脂糖凝胶电泳分离 DNA 片段，然后紧靠目的 DN
2024-06-01 31 -
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中DNA的回收（电洗脱至透析袋）
原理这种技术（McDonell et al. 1977 ) 可以从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶切片回收分子质量范围较宽的双链 DNA，并且产量较高。这种方法多少有
2024-06-01 25 -
碱性琼脂糖凝胶电泳
原理碱性琼脂糖凝胶电泳是在高 pH 条件下进行的，它能引起胸腺嘧啶和鸟嘌呤残基丢失一个质子，从而阻止与其各自的配对碱基-腺嘌呤和胞嘧啶间氢键的形成。变性的 DN
2024-06-01 27 -
中性聚丙烯酰胺凝胶电泳
材料与仪器DNA 样品丙烯酰胺 亚甲双丙烯酰胺 过硫酸铵 乙醇 凝胶载样缓冲液 KOH 甲醇 硅化液 TBE 电泳缓冲液 TEMED夹子或铁皮制纸夹 电泳装置
2024-06-01 33 -
脉冲场凝胶电泳的分子质量标准
原理PFGE 用于分离很大的 DNA 分子，因而需要很高分子质量的标准。这种标准可以按照 Lauer 等（1977 ) 介绍的方法从噬菌体，如 T7 (40kb
2024-06-01 26 -
横向交变场的脉冲场凝胶电泳
原理Gardiner 等（1986; Gardiner and Patterson 1989) 使用置于垂直凝胶两侧的两组铂线电极的凝胶电泳装置以分离大的 DN
2024-06-01 26 -
箝位匀强电场的脉冲场凝胶电泳
原理箝位匀强电场（contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝胶电泳中， 电场是由多个电极产生的。这些
2024-06-01 39 -
哺乳动物 DNA 的快速分离
原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb，适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化，或者是 5
2024-06-01 27 -
Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)
原理DNA 可以同时从琼脂糖两面向两张膜上转移。当需要用两种不同的探针分析相同的限制性内切核酸酶酶切片段时，这种方法是很有用的。DNA 片段转移速率较快，但是由
2024-06-01 25 -
用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取法纯化组织和细胞中的 RNA
原理在提取过程的第一阶段细胞的 RNA 酶应尽快灭活。一旦内源的 RNA 酶被破坏，RNA 受损的可能就大大降低，而纯化的过程就可以按合适的速度进行。材料与仪器
2024-06-01 25 -
oligo(dT)-纤维素层析法提取poly(A) + RNA
原理与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比，大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此，mR
2024-06-01 20 -
批量层析方法筛选 poly (A)+ RNA
原理当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时（<50 μg)，可选择用 oligo (dT) —纤维素进行批量层析的方法。这种方法采用级
2024-06-01 25 -
核糖核酸酶保护(用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图)
原理核糖核酸酶保护分析用于度量特异性 mRNA 的丰度以及为它们的拓扑异构特征作图。这种方法包括测试 RNA 与互补的放射标记的 RNA 探针（核糖探针）杂交，
2024-06-01 25
