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基因置换实验(—步基因破坏法)
材料与仪器酵母菌株7-1 BY4741 质粒pFA6a-kanMX6DNA 引物YPD 平板 SC-ura平板步骤
2024-05-30 26 -
杂交和数据处理
材料与仪器Cy3-和 Cy5-标记的 cDNA 玻璃微阵列DEPC处理的水 SDS SSC 酵母 tRNA Denhardt 溶液热循环仪 65℃ 水浴 芯片杂
2024-05-30 26 -
差减 cDNA 文库的建立实验
材料与仪器[+] 和 [-]cDNA 文库(ATCC 或 Stratagene)TE 缓冲液 EcoRI EDTA 蔗糖溶液 琼脂糖凝胶 TBE 缓冲液 乙醇
2024-05-30 36 -
基于 PCR 的差减 cDNA 克隆实验基本方案
原理材料与仪器A 和 B 类细胞的双链 cDNA (ds cDNA)ALuI RsaI ATP T4 多聚核苷酸激酶及其缓冲液 DNA连接酶和及其缓冲液 Taq
2024-05-30 23 -
痘苗载体转染细胞实验(DOTAP 法)
原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分
2024-05-30 35 -
痘苗载体转染细胞实验(CaCl2 法)
原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分
2024-05-30 34 -
痘苗病毒纯化实验(大规模纯化)
原理对于很多研究,部分纯化的病毒就足够了(进行到本实验步骤 14), 如果是纯化 MVA 病毒,则不能用胰酶消化,也不能用 CEF 细胞或 BHK-21 细胞代
2024-05-30 30 -
四环素控制系统诱导基因表达实验(pTet-tTAK 稳定转染(第二轮))
原理tTA 是一种融合蛋白,它是由来自于大肠杆菌的四环素抑制蛋白和疱疹病毒的 VP16 蛋白的转录激活区域组成的。在缺乏四环素时,tTA 就结合到并激活位于基因
2024-05-30 20 -
四环素控制系统诱导基因表达实验(pTet-tTAK 稳定转染(第一轮))
原理tTA 是一种融合蛋白,它是由来自于大肠杆菌的四环素抑制蛋白和疱疹病毒的 VP16 蛋白的转录激活区域组成的。在缺乏四环素时,tTA 就结合到并激活位于基因
2024-05-30 18 -
两种重组痘苗病毒共感染细胞
原理含有 pT7 控制的外源基因(本实验「重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染」)的重组质粒,通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此
2024-05-30 24 -
重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染
原理本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始,然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3(可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘
2024-05-30 42 -
组织切片染色方法大全
1油红O染色(Oil Red O Stain)油红O染色可用于脂肪细胞和中性脂肪的组织学染色。主要试剂丙二醇、油红O溶液、苏木精溶液染色特点脂肪细胞:红色中性脂
2024-05-27 803 -
PCR 产物电泳银染实验(聚丙烯酰胺凝胶法)
原理聚丙烯酰胺凝胶(PAG)是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺,在引发剂过硫酸胺(AP)提供自由基和催化剂四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯
2024-05-25 22 -
用于 PCR 的模板 DNA 制备实验(胸腹水或尿液)
材料与仪器步骤1. 标本 10 ml 以上,2000 r/min 离心 10 分钟,倒去上清液。用指弹匀沉淀物,加入适量组织裂解液,37℃ 下放置半小时以上。2
2024-05-25 24 -
用于 PCR 的模板 DNA 制备实验(含血标本)
材料与仪器步骤1. 3 ml 外周血或 1 ml 骨髓液放入含 50 μl 0.5mol/L EDTA 的无菌离心管(15 ml 管)中。2. 2000 r/m
2024-05-25 28