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脉冲场凝胶电泳制备DNA（酵母完整DNA的分离）
原理制备用于电泳的酵母 DNA，先用酶破坏酵母细胞胞壁，然后在熔化的低熔点琼脂糖中混悬，制成栓。将栓浸入含蛋白酶的裂解缓冲液，以加速细胞裂解和除去蛋白质。此方法
2024-05-20 30 -
脉冲场凝胶电泳制备DNA（哺乳动物细胞和组织DNA的分离）
原理本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要，DNA 也可以从哺
2024-05-20 26 -
聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收（压碎与浸泡法）
原理从聚丙烯酰胺凝胶中回收 DNA 的标准方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介绍的“压碎与浸泡”技术。洗脱下来的 DNA 通常不含有酶
2024-05-20 32 -
聚丙烯酰胺凝胶中DNA的放射自显影检测
原理丙烯酰胺凝胶电泳分离的放射性 DNA 条带可用放射自显影的方法检测。含有放射性 DNA 的聚丙烯酰胺分析凝胶，在放射自显影前通常要固定和干燥。然而，若要从凝
2024-05-20 49 -
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（用琼脂糖酶消化）
原理可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中，琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解
2024-05-20 27 -
长距离PCR
原理在标准 PCR 反应条件下，PCR 扩增 DNA 片段的长度一般为 1~2 kb，这种扩增能力对许许多多常规的 DNA 分子操作技术要求来说是已经足够了（如
2024-05-20 25 -
cDNA宏阵列方法分离拟南芥的臭氧应答基因实验
材料与仪器步骤##一、 cDNA 宏阵列的样品制备培养基： I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 养 基（GibcoBRL， Rockville
2024-05-20 24 -
用交换反应进行5'突出端DNA分子的磷酸化
原理T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应（Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5&#
2024-05-20 29 -
锚定酶消化cDNA实验
材料与仪器溶液与缓冲液 引物试剂盒 MPC-E PCR仪 Gene PulserII 型系统步骤实验方案 A1.通过加入下列物质来消化双链 cDNA2.在 37
2024-05-20 28 -
通过 cDNA宏阵列和基因表达谱检测 环境毒物的毒理效应实验
材料与仪器步骤一.材料1.扩增和制备克隆（1）甘 油 保 存 的E.coli, 质 粒 含 有 目 标 cDNA 插入片段。（2）Tag 聚合酶和缓冲液（New
2024-05-20 22 -
去磷酸化的平端或5'凹端DNA分子的磷酸化
原理在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中，带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。材料与仪器T4 噬菌体
2024-05-20 26 -
含5’突出羟基端的DNA分子磷酸化
原理本方案用磷酸酶去除核酸的 5' 磷酸根，然后在 T4 噬菌体多核苷酸激酶的催化下，以放射性标记的形式重新将磷酸加到核酸上，这是一种广泛应用于 32P
2024-05-20 35 -
用碱性磷酸酶进行DNA片段的去磷酸化
材料与仪器牛小肠碱性磷酸酶 虾碱性磷酸酶 蛋白酶 K 限制性内切核酸酶 DNA 样品氯仿 EDTA 乙醇 酚 氯仿 SDS 醋酸钠 TE Tris-Cl CIP
2024-05-20 23 -
比较分子生理基因组学 —cDNA阵列的异种杂交实验
材料与仪器步骤一、材料这里用到的所有化学试剂都为分子生物学等级，或者用它们最高纯度的等效物。所有的塑料和玻璃制品，包括瓶子和移液器吸头都要高压灭菌，在核酸实验操
2024-05-20 34 -
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3'端
材料与仪器限制性内切核酸酶 T4 噬菌体 DNA 聚合酶 模板 DNA醋酸氨 乙醇 酚 氯仿 T4 噬菌体 DNA 聚合酶缓冲液 dNTP 溶液Sephadex
2024-05-20 27
