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PCR技术大攻略
一、PCR技术及步骤聚合酶链式反应（PCR） PCR扩增产物的克隆 上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。 二、PCR常见问题汇总 1. 没有得到扩增产物 （
2024-11-09 30 -
长片段PCR扩增中几个常见问题的解决办法
1. 当PCR结果不满意时,考虑以下几个方面 (1)将PCR反应的试管与反应板紧贴, (2)使用50ul或更少反应体系时,勿使用AmpliWax,两个反应混合液
2024-11-09 35 -
30多种PCR技术
1、Allele-specific PCR：等位基因特异性PCR，设计引物时选择在基因组的多态性区域，使等位基因的突变定位在（或接近）引物的3'端，在严
2024-11-09 45 -
PCR扩增分离目的DNA片段实验原理、材料和步骤
一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用，掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚
2024-11-09 29 -
PCR基因扩增原理及方法步骤
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特
2024-11-09 27 -
实时荧光定量PCR原理和实验
无论是对遗传病(如地中海贫血和血友病)、传染病(如肝炎和艾滋病)或肿瘤进行基因诊断，还是研究药物对基因表达水平的影响，或者监控药物和疗法的治疗效果，定量PCR技
2024-11-09 40 -
影响PCR 结果的因素
1. 引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。设计引物应遵循以下原则：（1）引物长度： 15-30 bp，常
2024-11-09 39 -
酶切位点保护碱基-PCR引物设计用于限制性内切酶
本文给出了分子克隆中常用限制性内切酶的保护碱基序列，如AccI，AflIII，AscI，AvaI，BamHI，BglII，BssHII，BstEII，BstXI
2024-11-09 42 -
PCR反应条件如何选择？
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95
2024-11-09 38 -
PCR 扩增常见问题及特点
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。假阴性，不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备
2024-11-09 25 -
PCR一般步骤
(一)总RNA提取取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。 (1)
2024-11-09 30 -
HindIII和Bamh1酶切位点保护碱基的详解
用于基因工程的工具酶一,限制性内切酶(Endonucleosase)(一)限制性内切酶(Endonucleosase)的发现与分类1) 50年代初发现细菌能将外
2024-11-09 35 -
7年分子克隆经验总结
做了快7年的分子克隆，从加样加不好，到现在轻松PCR，我想分子生物学这块还是有很多经验可以分享一下的。或许很多人会说分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了，
2024-11-09 24 -
巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤
巢式PCR的定义巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引
2024-11-09 33 -
Overlap PCR（重叠PCR）的基本原理
Overlap PCR（重叠PCR）重叠PCR的应用是非常广泛的，他的原理其实很简单：比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因，你要将他们连接到一 起，我们首
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