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降落PCR
原理降落 PCR 是 Dn 于 1991 年最早发明的指每一个(或 n 个)循环降低 1(或 nC)退火温度,直至达到一个较低的退火温度,这个温度称为“touc
2024-05-15 31 -
降落 PCR基本方案
原理基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到
2024-05-15 25 -
ISPCR 扩增的产物的杂交和检测实验基本方案
材料与仪器探针SSC SDS 显影液 定影液 苏木精 PBS AEC 封阻液 NaCl Tris·Cl 二甲基甲酰胺 BCIP NBT 乙醇培养箱 盖玻片 载玻
2024-05-15 42 -
引物设计原理与方法
原理PCR 反应特异性扩增的一个关键条件是引物的正确设计,使用不合适的 PCR 引物容易导致实验失败:表现为扩增出目的带之外的多条带(如形成引物二聚体带),不出
2024-05-15 33 -
PCR引物设计及评价实验
原理聚合梅链式反应(polymerase chain reaction)即PCR技术,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA 序列的方法,故又称基因的体外扩增法。
2024-05-15 25 -
荧光标记法
原理荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比
2024-05-15 37 -
mRNA差异显示法
原理几乎所有的真核基因mRNA分子的3’-末端,都带有一个多聚的腺苷酸结构,即通常所说的poly(A)尾巴。因此,在RNA聚合酶的作用下,可按mRNA为模板,以
2024-05-14 47 -
Real-time PCR(基本方法二)
材料与仪器关于 Trizol Reagent 需要的试剂1. Chloroform:氯仿 (分析纯)2. Isoproplyl alcohol:异丙醇(分析纯)
2024-05-14 37 -
Real-time PCR(基本方法一)
材料与仪器RNA 提取试剂盒、DNase I、琼脂糖、DEPC 水、甲醛、凝胶板步骤实时荧光定量 PCR(Real-Time PCR)实验流程一、RNA 的提取
2024-05-14 30 -
实时荧光定量PCR技术
原理实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。材料与仪器
2024-05-14 24 -
反转录-聚合酶链反应
简介反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)使 RNA 检测的灵敏性
2024-05-14 24 -
反向 PCR 实验
简介反向 PCR 又称染色体缓移或染色体步移,可对未知序列扩增后进行分析,探索邻接已知 DNA 片段的序列,并可将仅知部分序列的全长 cDNA 进行分子克隆,建
2024-05-14 41 -
原位 PCR 实验
简介原位 PCR 是直接用细胞涂片或石蜡包埋组织切片在完整细胞中进行 PCR 扩增的方法。原位 PCR 是利用完整的细胞作为一个微小的反应体系来扩增细胞内的目的
2024-05-14 26 -
实时定量 PCR 实验
简介实时定量 PCR( qPCR ) 于 1996 年由美国 Applied Biosystems 公司首先推出。传统 PCR 方法可对特定 DNA 片段进行指
2024-05-14 24 -
环介导等温扩增技术在动物学中的应用
简介环介导等温扩增技术在动物学中的应用是一种新的核酸等温扩增方法,是利用 4 个特殊设计的引物和具有链置换活性的 DNA 聚合酶,在恒温条件下特异,高效,快速地
2024-05-14 26