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磷酸化蛋白的western blot之建议
1. 一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂，还要加入一定量的磷酸酶抑制剂，否则即使band压出来也会很浅，结果也不可信。2. 加一抗后最好4℃过夜
2024-11-25 247 -
Western Blot 常见问题分析
1. 在western实验中，通常有人采用TBS，有人采用PBS，在使用中有什么区别？答：选择合适的缓冲液对于维持一定PH值下蛋白质的稳定及保证实验的重复性是很
2024-11-25 144 -
Western Blot试剂的准备
1. 30%储备胶溶液： 丙烯酰胺（Acr） 29.0g 亚甲双丙烯酰胺（Bis） 1.0g 混匀后ddH2O，37℃溶解，定容至100m
2024-11-25 225 -
百奇生物的Western-Blotting方法
1. 溶液准备：转印缓冲液：0.025M Tris base , 0.192 M甘氨酸 , 30%甲醇10TBST:250mM Tris-HCl （ pH 8.
2024-11-25 89 -
电泳迁移实验(EMSA)方法
1. 探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffe
2024-11-25 146 -
硝酸纤维素膜与PVDF膜的区别
1. 硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光（Luminol类）、常规显色
2024-11-25 106 -
多肽保存使用小常识
1.多肽保存多肽一般长期保存需要避光并应在-20℃以下，-80℃效果更好，短期可以保存在4℃。可以短时间以室温运输。多肽在-20℃或更低温度下很稳定，特别是冷冻
2024-11-25 152 -
Western blot 实验技术
1975年，Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜（NC膜）上，并利用DNA－RNA杂交检测特定的DNA片段的方法，称为Southern印迹法。而后人
2024-11-25 121 -
PAGE胶上蛋白质的银染方法
PAGE胶上蛋白质的银染方法有数百种，其原理相似，具体步骤各不相同。银染为蛋白质的非特异性染色，呈“爆炸性”反应模式，用于蛋白定量时准确性差，但其敏感度高、简便
2024-11-25 197 -
胶体电泳法方法步骤
SDS 平板胶片铸造︰1） 整理出两组玻璃片及白板铸胶组合，先用酒精拭净，并选择合适的间隔条（0.75 mm） 组合起来。请熟悉铸胶三明治组合的正确组装方式，以
2024-11-25 104 -
T7Select 噬菌体展示系统
T7Select™ 噬菌体展示系统是Novagen开发的基于T7噬菌体(而非传统的M13)创新的基因发现研究产品。目的序列(C-端)与T7基因10 衣壳蛋白而表
2024-11-25 212 -
磷酸化蛋白 WB 做不好？文献指出了你可能忽略的重要原因
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时，磷酸化蛋白可能
2024-11-25 136 -
Western Blot 中隐藏的生化危机：抗体选择
Western Blot 又称为蛋白质印迹，是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。其基本原理
2024-11-25 175 -
Western Blot 中隐藏的生化危机 II：样品制备
Western Blot 又称为蛋白质印迹，是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。其基本原理
2024-11-25 110 -
WB 过程中常见问题及建议大汇总
Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物
2024-11-25 101
