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重组克隆筛选(酶切鉴定)
【实验目的】 1.掌握质粒提取的基本方法的原理; 2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。 【实验原理】 重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。
2024-09-23 48 -
载体多克隆位点(MCS)改造
加、减、换一个载体 的MCS的位点 (给一个表达 载体加、减、换小表达标签,如His6, His10,strep II等,和MCS改造是一样的),其实技术 不
2024-09-23 28 -
定点突变技术――从单点突变到多点突变
体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能,二者之间的关系是蛋白质组
2024-09-23 41 -
定点诱变(DpnI法)
1、引物设计:每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。 2、反应:使用高保真的pyrobest DNA聚合酶
2024-09-23 40 -
植物寡核苷酸荧光原位杂交技术方法
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridiza- tion, FISH)技术开发于20世纪80年代, 是植物细胞遗传学和基因组
2024-09-21 32 -
Southernblot问答
I'm trying to do a southern blot and I have a trouble, the bands I get are t
2024-09-21 28 -
ELISA实验所用试剂详解
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或
2024-09-21 31 -
微管蛋白基础
I. Useful Values1 mg/ml tubulin = 10 µM (assuming MW of ab-tubulin heterodimer i
2024-09-21 30 -
Comparative Genomic Hybridization(CGH)
ProtocolFor the original protocol describing CGH see the article by Kallioniemi
2024-09-21 34 -
艾滋病的基因治疗进展
艾滋病的基因治疗进展艾滋病是最严重的感染性疾病。截至2004年,全球感染艾滋病病毒的总人数已高达6 000多万(其中2 000多万已死亡)。特别是非洲地区,艾滋
2024-09-21 32 -
三维空间内随机抽样
三维空间内随机抽样我们不难发现对于所进行观察的切片,体视学有着自身的规定。同时,从统计学角度出发,不可能只在一张切片上观察计算便得到关于整个特征物的准确三维定量
2024-09-21 24 -
硝酸纤维膜固相杂交
核酸样品经过直接点样或转移到硝酸纤维膜上,固定后,可以进行杂交反应。在杂交溶液中,硝酸纤维膜上变性的核酸样品和变性后的探针在一定的条件下形成双链杂交核酸分子。然
2024-09-21 31 -
骨髓基质干细胞修复颅骨缺损
骨髓基质干细胞修复颅骨缺损1.实验动物毕格犬平均1岁龄,雌雄不限。氯胺酮10mg/kg肌内注射诱导后,肌内注射速眠新o.1m1/kg全麻,常规消毒、铺巾。16号
2024-09-21 25 -
Southern 杂交一般操作
一 酶切和电泳在200 μl 微量离心管中加入:25 μl DNA样品约10μg),3μl 限制性内切酶(MBI,10 U/ μl)5 μl 相应的10buff
2024-09-21 27 -
DNA原位核酸杂交方法
一、地高辛(Dig)标记DNA探针在石蜡切片上的检测方法1. 组织切片的预处理(1)固定:组织以10%中性福尔马林液,常规石蜡包埋,切片厚4-6 μm,最好用硅
2024-09-21 33