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油红染色法
油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。 试剂配制:油红O 0.5g异丙醇(含量98%) 10
2024-05-25 1120 -
Southern印迹技术
简介Southern印迹技术(Southern blot)是将DNA转移到固相支持物上,然后与存在于液相中的标记探针进行杂交的过程。Southern印迹技术可检
2024-05-25 54 -
Southern blot技术
原理具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性
2024-05-25 41 -
cDNA文库构建
原理cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建的基本原理
2024-05-25 58 -
DNA文库的构建及其筛选
原理高等植物基因组的一个显著特征是其内含有大量的 DNA 重复序列, 重复序列常位于异染色质区, 因此可能与染色体的结构有关 . 季静等根据国际上 对基因组、染
2024-05-25 33 -
质粒 DNA 大量制备实验(平衡离心法)
原理这种方法可以得到除去了大多数杂质的高纯度质粒DNA。但它需要使用溴化乙锭,并且需要长时间的超速离心来形成密度梯度。 材料与仪器DNATE 氯化铯 溴化乙锭
2024-05-25 31 -
质粒 DNA 大量制备实验(碱裂解法)
原理这一方案科能是最常用的质粒制备方法,该法不仅相当决捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。材料与仪器大肠杆菌葡萄糖 Tris EDTA TE NaOH SD
2024-05-25 29 -
M13 噬菌体衍生载体的制备实验(载体衍生法)
材料与仪器质粒YT培养基离心机 分光光度计 摇床步骤1. 将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 :50稀释,在含有适当抗生素的2xYT培养液(1~5 ml)
2024-05-25 33 -
CTAB法(植物组织制备基因组 DNA 实验)
原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提
2024-05-25 32 -
氯化铯法(植物组织制备基因组 DNA 实验)
原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提
2024-05-25 30 -
制备DNA(哺乳动物中制备基因组 DNA 实验)
材料与仪器动物组织PBS 乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 异戊醇 TE离心机 摇床 研钵步骤1. 切下组织并立即剪成小块,置于液氮中冻结。 2. 将200 mg~1
2024-05-25 30 -
DNA定点突变实验
原理定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除
2024-05-22 80 -
乙醇沉淀法(沉淀 DNA 的实验)
原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合
2024-05-22 67 -
多样抽滤法(DNA 斑点和狭线印迹实验)
原理斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的技术。材料与仪器DNASSC NaCl NaOH Tris·Cl紫外透射仪
2024-05-22 25 -
DNA琼脂糖核酸电泳
原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝
2024-05-22 40