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PCR-DGGE(Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)
1.了解PCR-DGGE技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-DGGE技术的步骤。【实验原理】 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分
2024-11-11 90 -
原位聚合酶链式反应与原位反转录聚合酶链式反应操作规程
(一)、 仪器 设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol
2024-11-11 101 -
聚合酶链反应-单链构象多态性分析
PCR-SSCP分析的基本程序为:首先PCR扩增特定靶序列,然后将扩增产物变性为单链,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,D
2024-11-11 98 -
建立PCR实验室
为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出.1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作
2024-11-11 108 -
实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)
mRNA表达的研究 微小残留病变的检测 肿瘤耐药基因表达的研究 病毒感染的定量监测Vs普通PCR,RT-PCR的优势 采用封闭的检测模式,因此扩增产物导致污染的
2024-11-11 100 -
查尔酮合成酶基因的克隆
一、实验目的与意义 学习PCR操作技术,利用基因全长引物,扩增出查尔酮合成酶基因的全长,使学生掌握PCR的基本原理和操作。 二、实验原理 聚合酶链反应(Poly
2024-11-11 103 -
PCR-SSP法在HLA-B27检测中的应用研究
摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符
2024-11-11 91 -
增加PCR的保真性:高保真酶、酶的混合物及其他因素
高保真酶 高温DNA POLYMERASE是以单链DNA或RNA为模板,在dNTP和一些阳离子的存在情况下,在特定的引物指导下按3'-5'
2024-11-11 109 -
PCR技术在苯酶同尿症诊断中的应用
PKU的临床表现PKU患儿由于苯丙氨酸羟化酶的缺乏或不是使苯丙氨酸在休丙大量堆识,并经旁 路代谢途径产生一系列的毒性代谢产物而该小儿产生一系列的明显中毒症状.患
2024-11-11 78 -
错配PCR-限制性片段长度多态性分析检测HBV前终止密码变异株技术
错配PCR-限制性片段长度多态性分析检测HBV前终止密码变异株技术的建立及临床应用周伯平 徐六妹 王火生 付涌水李卫宁 韩红星 马为民 袁 静深圳市东湖医院 深
2024-11-11 92 -
PCR技术:PCR扩增产物的电泳分析
凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种. 一、琼脂糖凝胶电泳: 琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和 鉴定核酸的方法.琼脂糖是从海藻
2024-11-11 113 -
实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)的研究进展及其应用
1 实时荧光定量PCR技术的方法学 1.1 原理 所谓real-time Q-PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR
2024-11-11 94 -
RT-PCR在基因表达检测中的应用
RT-PCR检测基因表达的问题讨论 关于RT-PCR技术方法的描述参见PCR技术应用进展, 在此主要讨论它在应用中的问题。理论上1μL细胞质总RNA对稀有
2024-11-11 104 -
引物合成介绍及常见问题
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的
2024-11-11 95 -
分级定量PCR检测血清HBV DNA
主题词 乙型肝炎病毒;DNA,病毒/分析;聚合酶链反应 中国图书资料分类号 R512.62 摘 要 目的 利用竞争PCR法建立分级测定HBV DNA含量的定量方
2024-11-11 107