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放射性同位素标记的DNA序列测定分析
原理使用一种单链的DNA 模板或经变性的双链DNA 模板和一种恰当的DNA 合成引物。DNA 聚合酶利用单链的DNA 模板,合成出准确互补链,在合成时,某种dN
2024-05-22 32 -
高地辛标记的 DNA 探针制备实验基本方案
材料与仪器DNAdTTP dUTP EDTA SDS水浴锅 培养箱步骤1. 建立一个标准100 μl 反应体系,用10 μl,10地高辛·11-dUTP/dT
2024-05-22 36 -
基因转染(磷酸钙-DNA共沉淀法)
原理核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时,可使DNA 附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA 仅有1
2024-05-22 48 -
化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法
原理DNA 在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊
2024-05-22 97 -
SSR标记实验步骤
原理与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以 孟德尔方式
2024-05-22 60 -
冻融法回收DNA片段
原理冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。
2024-05-22 38 -
水溶液中杂交(DNA 片段探针的应用实验)
材料与仪器DNA杂交液 洗膜液培养箱步骤1. 除了于65℃在杂交液Ⅰ中温育的条件外,预杂交按甲酰胺法进行。 2. 按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀
2024-05-22 26 -
甲酰胺法(DNA 片段探针的应用实验)
材料与仪器DNA杂交液 洗膜液注射器 超声仪 水浴锅步骤1. 用5~20 ml 杂交液Ⅰ依次浸泡10~20张硝酸纤维素滤膜。滤膜装入杂交袋中,加入足够的杂交液
2024-05-22 36 -
制备YAC DNA进行Southern印迹分析
材料与仪器酵母菌AHC SCE SCEM Tris·Cl EDTA TE 乙酸甲 RNase A 异丙醇 NaCl培养箱 离心管 转子步骤1. 接种一个红色的
2024-05-22 27 -
YAC 克隆的分析实验基本方案
材料与仪器酵母菌AHC YPD 甘油培养箱 冷冻管步骤1. 用接种棒将含重组载体pYAC的AB1380菌株划线接种在AHC平板上,倒扣平板于30℃培养,直至长
2024-05-22 36 -
真核细胞利用 DEAE- 葡聚糖的转染实验
材料与仪器DNATBS DMEM 葡聚糖 DMSO PBS培养箱 离心管步骤1. 接种约5105小鼠L型成纤维细胞/10 cm培养皿,培养3天至30%~50%
2024-05-22 32 -
嵌套缺失和互补寡核苷酸进行接头分区诱变
材料与仪器DNA雾水乙醇 EDTA T4 DNA连接酶 TE NaCl培养箱 水浴锅步骤1. 用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在质粒的目的区域产生一嵌
2024-05-22 29 -
利用生物素标记引物
材料与仪器DNA生物素 Tris·Cl MgCl2 DNA聚合酶 dATP dCTP dGTP dTTP热循环仪 尼龙膜 滤纸 离心机步骤1. 在微量离心管中
2024-05-22 36 -
α-标记核苷酸进行热循环测序反应
材料与仪器DNADNA测序缓冲液 dATP DNA聚合酶热心换反应装置 离心机步骤1. 对应于毎个待测模板,分别以A、G、C、T 标记好4个微量离心管。2.
2024-05-22 35 -
测序酶进行标记测序反应
材料与仪器DNA寡核苷酸引物 测序酶终止混合液 测序酶缓冲液 焦磷酸酶混合液离心机 离心管 微量滴定板步骤1. 对于每个单链模板:将下列试剂混合于0.5 ml
2024-05-22 40