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单酶单DNA样品消化
原理限制性内切酶种类虽然很多 , 但反应条件都十分相似 。一般需要较纯的底物DNA、Mg2+、Tris-HCl 缓冲液, 通常在37℃保温以酶解DNA 。材料与
2024-05-18 44 -
按大小分离RNA:在含有甲醛的琼脂糖凝胶上进行的RNA的电泳
原理RNA 样品经甲酰胺处理以及经含有甲醛的凝胶电泳分离可能会发生变性,这一方法是从 Lehrachetal. (1977), Goldberg (1980),
2024-05-18 33 -
DNA 体外重组
简介DNA 体外重组,又称基因克隆,是基因操作中最基本的技术,也是分子生物学的核心技术。DNA 体外重组包括:欲进行重组的 DNA 片段(常称为目的 DNA)
2024-05-18 71 -
自动激光荧光 DNA 测序
简介目前,自动激光荧光 DNA 测序技术(又称第一代测序技术)的应用已十分普遍。自动激光荧光DNA测序的基本原理均基于Sanger双脱氧法,但不同的自动激光荧光
2024-05-18 33 -
焦磷酸测序
简介焦磷酸测序 (pyrosequencing) 是一种基于发光法测定焦磷酸 (PPi) 的测序技术。焦磷酸测序技术的三个关键点分别是:①反应中使用 dATP
2024-05-18 31 -
利用ENU诱变模式生物基因组
简介乙酰基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)是目前最常用的小鼠诱变剂,它是一种烷化剂,可以将其乙烷基转移到 DNA 碱基的氧原子或氮
2024-05-18 83 -
piggyBac转座子系统诱变基因组
简介转座子(transposon)是一类可在基因组中发生位置移动的 DNA 片段,其移动过程被称为转座(transposition)。根据转座机制的不同,转座子
2024-05-18 51 -
SB转座子系统诱变基因组
简介转座子(transposon)是一类可在基因组中发生位置移动的 DNA 片段,其移动过程被称为转座(transposition)。根据转座机制的不同,转座子
2024-05-18 36 -
细胞原位杂交法(固相杂交-荧光原位杂交法)
简介荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)中的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用核素标
2024-05-18 38 -
细胞原位杂交法(固相杂交-菌落/噬菌斑原位杂交)
简介菌落/噬菌斑原位杂交是一种在硝酸纤维素滤膜上原位裂解细菌菌落并将释放出来的 DNA 非共价结合于滤膜的方法。结合于滤膜上的 DNA 再与相应的放射性标记核酸
2024-05-18 82 -
膜印记杂交法(固相杂交-斑点/狭缝印迹杂交法)
简介斑点印迹杂交法(dot blotting)是将 RNA 或 DNA 变性后直接点样于硝酸纤维素膜或尼龙膜上,再采用特定的探针进行杂交;狭缝印记杂交(slot
2024-05-18 91 -
膜印记杂交法(固相杂交-Northern 印迹杂交法)
简介Northern 印迹杂交(Northern blotting)是通过凝胶电泳使完全变性的 RNA 按大小分离,然后利用印迹技术将 RNA 分子转移到固相支
2024-05-18 41 -
膜印记固相杂交法(固相杂交-Southern 印迹杂交)
简介DNA 的印迹杂交,又称 Southern 印迹杂交(Southern blotting),是指将通过凝胶电泳分离的DNA片段转移到特定的固相支持物上,在转
2024-05-18 41 -
基于易错 PCR 产生随机突变体
简介易错 PCR (error-prone PCR ) 是产生随机突变体的另一常用方法,通过改变传统 PCR 反应体系中的 Mg2+ 浓度、dNTP 的浓度比例
2024-05-18 125 -
基于化学诱变法产生随机突变体
简介化学诱变法(chemical mutagenesis)是将 DNA 片段暴露于化学诱变剂如亚硝酸、羟胺、亚硫酸氢盐或阱,然后将 DNA 片段克隆形成一个小的
2024-05-18 33