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放射自显影和从测序凝胶上读取 DNA 序列实验
材料与仪器步骤材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的配方见附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。凝胶固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性
2024-06-04 82 -
含尿嘧啶的单链噬菌体 M13 DNA 制备实验
材料与仪器缓冲液和溶液 乙醇 氯化钠 苯酚 醋酸钠 TE 琼脂糖凝胶 原始的重组 M13 噬菌体 单链 DNA YT 培养基Corex 离心机管 巴斯德滴管 柱
2024-06-04 68 -
寡核苷酸指导的单链 DNA 诱变实验
材料与仪器适用于转化的大肠杆菌菌株 用于转化的大肠杆菌 TG1 感受态菌ATP PE1缓冲液 PE2 缓冲液 噬菌体 T4 DNA 连接酶 噬菌体 T4 多核苷
2024-06-04 72 -
大肠杆菌的电击转化实验
原理转化（transformation）是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细
2024-06-04 66 -
以双链 DNA 为模板的体外诱变：用 DpnⅠ选择突变体实验
材料与仪器带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株ATP 含有四种 dNTF 的混合溶液 诱变缓沖液 NaOH NaAC TE 噬菌体 T4DNA 连接酶
2024-06-04 77 -
USE 诱变实验
材料与仪器带 mutS 表型（例如 BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态 带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态退火缓冲液 贮存液 合成缓冲液 噬菌体 T
2024-06-04 76 -
利用大引物 PCR 在同一试管中进行高效快速定点诱变实验
材料与仪器扩增缓冲液 含有四种 dNTP 的混合溶液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 正向和反向内引物 诱变引物 模板 DNA带屏障装置的自
2024-06-04 71 -
重叠延伸产生特异位点诱变实验
材料与仪器扩增缓冲液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 模板 DNA带屏障装置的自动移液器吸头 微型离心管酶 可调式移液器 可按
2024-06-04 71 -
小量细菌克隆的杂交法筛选实验
原理主琼脂板上和覆盖于另一块琼脂板表面的硝酸纤维滤膜或尼龙膜上的细菌克隆可以被定位， 经过一段时间，已经在滤膜上生长的克隆可以被原位裂解以备杂交之用。同时，主琼
2024-06-04 66 -
中等量细胞克隆的杂交法筛选实验
原理这一方法适用于任何大小的细菌克隆，但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号，而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中 采用能够包
2024-06-04 68 -
用放射性标记的寡核苷酸杂交筛选定点诱变重组克隆实验
原理材料与仪器甲酸铵 寡核苷酸杂交溶液 寡核苷酸预杂交液 TE 噬菌体T4多核苷酸激酶 限制性内切核酸酶 琼脂糖凝胶 诱变寡核苷酸 [γ-32P]ATP 2XY
2024-06-04 83 -
大量细菌克隆的杂交方法筛选实验
原理这一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)报道，主要用来处理由质粒 cDNA 文库转化的细菌。将转化菌的混合物或者一份扩增的
2024-06-04 59 -
单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验
材料与仪器扩增缓冲液 dNTP 混合溶液 甲酰胺上样缓冲液 蔗糖凝胶缓冲液 TBE 电泳缓冲液 限制性内切酶 热稳定 DNA 聚合酶 人类基因组 DNA 正向引
2024-06-04 76 -
外切核酸酶 Ⅲ 消化产生多组嵌套缺失突变体
材料与仪器dNTP 溶液 乙醇 外切核酸酶Ⅲ缓冲液 核酸酶 S1 停止反应混合液 酚 氯仿 醋酸钠 外切核酸酶Ⅲ Klenow 混合物 连接混合物 核酸酶 S1
2024-06-04 55 -
BAL31 核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验
材料与仪器BAL31 缓冲液 EGTA 乙醇酚 氯仿 醋酸钠 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE 噬菌体 T4DNA 聚合酶 BAL31 核酸酶 大肠杆菌 DNA 聚合酶
2024-06-03 57
