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通过 PCR 方法对微量 DNA 进行定量分析实验基本方案
材料与仪器DNA蛋白酶消化缓冲液 20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃) 用 50 mmol L Tris . Cl 10 mmol L EDTA pH 7
2024-05-20 61 -
ras2抑制基因的分离实验
材料与仪器酵母菌株FY 86 DAY229 DAY230质粒文库DNA 乙酸裡 PEG3350 大肠杆菌细胞 葡萄糖 EDTA SDS TE 缓冲液YPD 平板
2024-05-20 55 -
利用VOTE系统（T7RNA 聚合酶系统基因表达实验）
原理VOTE是最近发展的痘苗病毒/T7 RNA聚合酶混合表达系统，将外源基因克隆到质粒 pVOTE. 1或 pVOTE. 2 中，通过同源重组将其整合到痘苗病毒
2024-05-20 164 -
单病毒感染OST7-1细胞（T7RNA 聚合酶系统基因表达实验）
原理OST7-1 细胞来源于鼠 L929 细胞，能在细胞质中持续表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶，因此，应用此细胞系无需用 vTF7-3 感染细胞。材料与仪器贴
2024-05-20 68 -
两种重组痘苗病毒共感染细胞（T7RNA 聚合酶系统基因表达实验）
原理含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基因表达实验」中「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,
2024-05-20 92 -
痘苗 DNA 检测实验Southern 杂交法
原理以前，用 HindIII 限制性内切核酸酶消化鉴定痕苗病毒 DNA。大部分的外源基因插入重组病毒的 TK 基因中，TK 基因位于 HindIII 5.1 k
2024-05-20 60 -
痘苗 DNA 检测实验斑点杂交法
材料与仪器贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞 重组病毒噬斑悬液NaOH Tris • Cl 2SSC PBS 胰酶／EDTA 干冰／
2024-05-20 54 -
痘苗 DNA 检测实验PCR 法
原理材料与仪器贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞 重组病毒噬斑悬液PBS 胰酶／EDTA 干冰／乙醇 DNA 提取缓冲液 乙酸钠 乙
2024-05-20 79 -
痘苗病毒 DNA 提取实验基本方案
材料与仪器纯化的痘苗病毒Tris•Cl 溶液 SDS 蔗糖溶液 蛋白酶 K 用 50 mmol／L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚 1：1苯酚氯仿 1 mo
2024-05-20 57 -
DNA琼脂糖凝胶电泳
原理利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电，在电场中向正极移动，且相同数量的双链DN
2024-05-18 86 -
部分消化
原理有时需要得到仅在DNA片段的内部存在的部分限制性位点切割产生DNA，这在用待克隆片段内部存在的限制酶切位点进行克隆和构建酶切图谱时特别有用。材料与仪器DNA
2024-05-18 49 -
消化多个DNA
原理当消化多个样品时，以下方案可减少取吸次数，节省时间和减少污染的机会。材料与仪器DNA步骤1. 分别加入相同体积的各个样品DNA至不同微量离心管中。 为避免
2024-05-18 67 -
单酶单DNA样品消化
原理限制性内切酶种类虽然很多 , 但反应条件都十分相似 。一般需要较纯的底物DNA、Mg2+、Tris-HCl 缓冲液, 通常在37℃保温以酶解DNA 。材料与
2024-05-18 71 -
按大小分离RNA：在含有甲醛的琼脂糖凝胶上进行的RNA的电泳
原理RNA 样品经甲酰胺处理以及经含有甲醛的凝胶电泳分离可能会发生变性，这一方法是从 Lehrachetal. (1977), Goldberg (1980)，
2024-05-18 62 -
DNA 体外重组
简介DNA 体外重组，又称基因克隆，是基因操作中最基本的技术，也是分子生物学的核心技术。DNA 体外重组包括：欲进行重组的 DNA 片段（常称为目的 DNA)
2024-05-18 89
