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创造新的酶切位点
将互相匹配的DNA末端连接起来可以产生新的酶切位点。这些DNA末端可以通过以下方法获得: 1. 补平5′突出的粘性末端产生平末端 2. 双酶切产生的平末端 3.
2024-10-23 76 -
Restriction digestion
Restriction enzyme digestions are performed by incubating double-stranded DNA mo
2024-10-23 86 -
Partial Endonuclease Digestion
Prepare a 100 µl reaction mixture containing the DNA of interest in the appropri
2024-10-23 62 -
Restriction Enzyme Digestion of DNA
Materials:10X restriction enzyme buffer (see manufacturer's recommendation)D
2024-10-23 69 -
DNA 的定量与连接反应
药品试剂:纯化的gusA 片段及pQE31 BamHI/HindIII 片段1% 6-well agarose gelDNA 标准分子量 (λMr, 0.5 μ
2024-10-23 87 -
Restriction Enzyme Buffer
Restriction Enzyme Buffer Most enzymes can use REact buffers; however, some are
2024-10-23 69 -
Erase-a-Base System
The Erase-a-Base® System is designed for the rapid construction of plasmid or M1
2024-10-23 77 -
E. coli K-12限制外源DNA
E.coli有几种机制可以辨别并破坏外源DNA。但这也成为克隆实验的重要问题,因为其导致了所要序列的回收量大大减少。这一问题可以使用通过突变关掉这些机制的菌株来
2024-10-23 83 -
Random Primer DNA Labeling
For use with GibcoBRL Random Primer DNA labeling system.Objective:To produce rad
2024-10-23 79 -
酶切反应(Setting Up a Restriction Endonuclease Reaction)
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在
2024-10-23 75 -
内切酶在37°C条件下的活性(Activity of Thermophiles at 37°C)
下表中列出了最适温度不是37C的限制性内切酶在37C条件下的酶活性。酶最适温度37℃%活性Apa I25℃100*ApeK I75℃n/aApo I50℃50B
2024-10-23 71 -
金纳米粒子法可快速检测牛奶中三聚氰胺
4月1日,美国研究人员报告说,他们开发出一种简单、方便的新方法,可在短时间内检测出牛奶中是否含有三聚氰胺。美国迈阿密大学、西北大学和加州大学洛杉矶分校等机构的研
2024-10-23 71 -
分子实验方法10:测序技术
在分子生物学研究中,DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和
2024-10-23 75 -
限制性内切酶质量控制(Restriction Endonucleases: Quality Control)
单位定义限制性内切酶的一个活性单位是指,在50μl 的反应体系里,采用随酶提供的 NEBuffer,用1个小时的时间,彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量。 酶
2024-10-23 56 -
CIP Treatment
1. set up the following reaction:CIP RxnH 2 O7.8 ml10x cip rxn buffer2.0 mlDNA (
2024-10-23 61