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细胞因子和重组蛋白溶解必读(一)
我们知道,PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉,这使得运输非常便捷,只要常温即可。而且,细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定,在-20℃或-80℃条件下可保
2025-03-20 17 -
转染细胞不表达怎么办
问:最近做细胞转染,预筛选稳定克隆,载体为pEGFP-N1,pIERS现在是平行做几个基因,转然后,只有空载体和一个基因可以看到绿色荧光,其余均没有,这会是什么
2025-03-20 14 -
萤光素酶载体PGL3转染细胞要不要加G418
问:最近要做萤光素酶载体PGL3转染细胞,PGL3载体上面带有neo的抗性标记,有一个老师和我说要培养基里面要加G418筛选,但我查了一些PGL3载体转染的文献
2025-03-20 11 -
g418如何配制
问:最近要做稳定转染了,但不知道如何配制G418,有一些细节想问问大家,我打算用PBS来配,我想问问是用高压过的PBS来配,还是用未高压的PBS配,配完了是不是
2025-03-20 13 -
细胞接种密度
问:最近的一个实验困扰我许久,就是关于给药剂量的问题,具体如下: 我在培养瓶中按1*10E6密度观察了心肌细胞的搏动和药物的干预情况,接下来想做MTT,需要用9
2025-03-20 18 -
质体转染293细胞后,细胞漂浮死亡?
问:这几天做293细胞的脂质体转染,为腺病毒的包装阶段.用最小的培养瓶(好像是25ml的),加入脂质体10μl,pacI酶切纯化物8μg 进行转染.细胞最密处为
2025-03-20 12 -
Intercellular Adhesion Molecules (ICAM-1, VCAM-1, and LFA-1) in Adenocarcinoma of Lung: Technical As
Cell adhesion molecules (CAMs) such as intercellular adhesion molecule (ICAM-1),
2025-03-20 11 -
caspase-3的检测方法
问:在本版里有看到过有关caspase-3的检测方法(1):免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞(2):western blot 理想结果
2025-03-20 20 -
做稳定转染选择何种质粒提取试剂盒
问:我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢答:您的情况我们去年也
2025-03-20 10 -
请教 luciferase 的 具体操作PROTOCOL
问:我要做LUCIFERASE 了,可是我一点概念都没有。有哪位有具体的操作PROTOCOL?还有一些白痴问题luciferase 要检测什么呢?是把我的带有L
2025-03-20 19 -
GFP转染后克隆筛选
问:我最近对肿瘤细胞转染GFP,其中不含有其他外源性基因。转染后短期内发现阳性细胞非常多,可是随着时间及细胞的增殖,培养孔内的细胞总数在不断的增加,但是发绿色荧
2025-03-20 17 -
免疫磁珠分选的问题
问:现用免疫磁珠(美天妮)分选cd4+和cd8+T淋巴细胞,效果不是太理想。单个核细胞2106,分离出cd4+只有1105个,buffer等试剂都没有问题。不知
2025-03-20 16 -
细胞稳定转染建系后再转染的问题
问: 细胞稳定转染建系后,转染的质粒细胞内本身有较高表达,我的质粒是点突变的质粒,我做的是稳定转染,按理论稳定建系后不应该对细胞增值有影响的。根据实验设计,我往
2025-03-20 15 -
如何提高U251的转染效率
问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectami
2025-03-20 12 -
免疫荧光双标
问:神经干细胞nestin和EphrinA4的免疫荧光双标怎么做?答:过程和一般的免疫染色一样就是封闭的时候用两种血清混合封闭1:1加入一抗和二抗的时候也是混合
2025-03-20 10