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shRNA序列设计的关键因素
1. 靶点选择①特异性:选择的靶点序列应与目标基因的mRNA序列高度特异,避免与其他非目标基因序列有显著的同源性,以减少脱靶效应。②保守性:同时,靶点序列
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shRNA序列设计实战技巧:优化基因表达调控
一、靶点选择与评估㈠特异性评估:①选择与目标基因mRNA序列高度特异且避免与其他基因同源的靶点。②利用生物信息学工具(如BLAST)进行序列比对,评估靶点的特
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介绍一些常用的shRNA表达载体
1. 质粒载体质粒载体是最常见的shRNA表达载体之一,它们通常包含RNA聚合酶III型启动子(如U6或H1启动子),这些启动子能够驱动shRNA的转录。质粒载
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最新shRNA序列设计趋势与策略
一、shRNA序列设计原则①发夹结构:shRNA包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔,组成发夹结构。这种结构是shRNA发挥作用的基础。
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构建shRNA序列设计流程
一、目标基因选择与shRNA设计①明确目标基因:确定需要调控的目标基因及其在细胞或组织中的功能。②选择靶序列:利用在线工具(如RNAi Design T
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阐述siRNA和shRNA在细胞实验中的使用差异
1. 结构与构建方式siRNA:结构:siRNA是一种双链RNA分子,长度通常在21-23个核苷酸之间,其3'端常有两个游离的碱基。这种结构使得si
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分析siRNA和shRNA在细胞实验中可能遇到的问题及相应的解决方案
问题1:转染效率低分析:siRNA的转染效率受到多种因素的影响,包括细胞类型、转染方法、siRNA浓度等。解决方案:①选择合适的转染方法,如化学转染
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siRNA、shRNA 都是啥?
siRNA siRNA是一种双链RNA分子,通常由20-25个核苷酸组成。其主要功能是在RNA干扰(RNAi)过程中通过与目标mRNA互补结合并引导其降解,
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介绍提高shRNA转染效率的具体方法
1. 优化RNA序列㈠使用合适的启动子和终止子序列:这可以增强RNA的稳定性和目标基因的表达水平。㈡选择合适的引物设计:确保引物与RNA序列的互补性高,
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解锁shRNA序列设计的秘密【提升实验成功率】
一、明确设计目标首先,明确你的实验目标,即确定你想要沉默的目标基因。了解目标基因的功能和表达模式,有助于你更准确地设计shRNA序列。二、设计原则①特异性:
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琼脂糖凝胶电泳步骤
一、实验准备在开始实验之前,首先需要用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,确保无杂质残留。随后,将模具放置在制胶平板上,并架好梳子,为后续的凝胶制备做好准备。①
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提供预防琼脂糖凝胶中核酸降解的方法
㈠、使用无核酸酶的试剂和耗材原理核酸酶能够降解核酸,因此使用无核酸酶的试剂和耗材可以有效避免核酸在制备和电泳过程中的降解。操作确保所有与核酸接触的器皿、溶
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琼脂糖凝胶电泳的上样量是多少?
一、上样量的基本范围琼脂糖凝胶电泳的上样量一般取决于琼脂糖凝胶的大小和浓度,以及DNA的浓度和纯度等因素。通常而言,上样量建议在0.1至1.0 μg之间。这个范
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Utility of Animal Models for Human Embryo Culture: Nonhuman Primates
Nonhuman primates are the closest relatives to humans and therefore our most evo
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琼脂糖凝胶电泳原理
一、基本原理琼脂糖凝胶电泳是一种基于电泳现象和分子筛效应的技术,主要用于分离和鉴定不同大小的DNA或RNA分子。其基本原理包括两个方面:①电泳现象:在电场中