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电转染实验时,细胞密度是多少合适?
进行电穿孔实验时.,需确定每种细胞类型的最佳细胞密度,以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说,在含电转试剂的终体系中,电穿孔时的细
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慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因
慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因:病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可
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细胞计数的方法
细胞计数是生物学研究和临床实验中常用的技术,用于确定样本中细胞的数量。根据不同的研究需要,细胞计数的方法有很多种。常见的细胞计数方法包括:1. 显微镜计数法显微
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siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇
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细胞RNA转染实验的一些建议
1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,
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细胞转染注意事项
1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或2106-4106
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如何利用好慢病毒感染的原理和特点?
一、原理慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 si
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细胞转染实验效率影响因素
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选
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RNA转染与人鼻病毒1B基因敲除和干扰素应答的再激活研究
人鼻病毒(HRV)是属于Picornaviridae家族肠道病毒属的单链正义RNA病毒。它在20世纪50年代首次被发现。将近60年后,已经鉴定出超过100种
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如何选择哺乳动物高效表达载体
选择适合哺乳动物细胞的高效表达载体时,通常需要考虑以下几个关键因素:1. 目标蛋白的特性蛋白大小和复杂性:如果你的目标蛋白比较大或具有复杂的后期修饰(如糖基化、
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电转染实验的建议
关于细胞的电转染实验,现提出以下几点建议供大家参考:1. 选择合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;
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在慢病毒感染细胞的实验中,感染后细胞状态看起来正常,但传代培养后细胞死亡较多的原因
在慢病毒感染细胞的实验中,感染后细胞状态看起来正常,但传代培养后细胞死亡较多,这种情况可能与以下原因有关:1. 慢病毒感染对细胞的潜在毒性尽管慢病毒是常用的载体
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如何观察细胞?
培养细胞后,要时刻观察我们的细胞,无论是用眼睛还是显微镜观察,我们要了解他们的状态,每个实验的培养条件不同,只有时刻了解他们,及时调整,才能做好后续实验。划重点
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细胞转染siRNA后,目标基因的表达反而升高的原因是什么?
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起,常见的因素包括:siRNA设计不合理:siRNA的靶点选择不佳,未能有效靶向目标基因的mRNA,导致抑
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提高病毒感染细胞实验效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。1.提前一天细胞铺板提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在