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兔胸主动脉平滑肌细胞的原代培养
由于心血管系统发病率、病死率高,严重威胁人类生命,随着心血管疾病研究的不断深入,以体外培养的血管平滑肌细胞作为研究模型,在心血管疾病,特别是在动脉粥样硬化研究中
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慢病毒感染,铺板后24小时感染,病毒量是不是按铺板时细胞数的二倍计算的?
一般来说,慢病毒感染时,病毒量的计算主要依据目标MOI(Multiplicity of Infection)以及当前的细胞数量。铺板后24小时的细胞数量可能会有
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细胞DNA转染注意事项
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选
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双质粒表达系统,如何选择启动子?
1. 使用不同的启动子:为两个质粒选择不同类型的启动子,避免它们之间的竞争这个建议是针对以下情况的:启动子竞争效应:如果两个质粒使用相同或类似的启动子,尤其是强
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细胞转染效率影响因素
转染技术是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具
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为什么我的细胞转染实验效率较低?
1)实验条件优不佳:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外
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为什么脂质体细胞转染试剂会造成细胞毒性?
已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep
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RNA细胞转染实验影响因素
转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大
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如何达到较高的RNA转染效率?
可从以下几方面进行优化:1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余
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细胞铺板密度对于siRNA转染为什么很重要?
RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就
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关于四季青优级胎牛血清相关介绍
关于四季青无支原体优级胎牛血清相关介绍无噬菌体、低内毒素1)优级胎牛血清100ml无噬菌体、低内毒素优级胎牛血清: 本品采自出生前胎牛,3次0.1um过滤。极佳
四季青 优级胎牛血清 -
siRNA转染至细胞有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能
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对于难转染的细胞,如何提高其转染效率?
对于难转染的细胞的转染,如何提高转染效率的问题也是目前研究的技术难题。一般建议使用电转的方法,但是由于电转的方法对细胞损伤比较大,该方法也未必是最佳的。推
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慢病毒滴度的计算
实验准备目标细胞:选择适合慢病毒感染的细胞株(如 HEK293T 或靶细胞)。病毒稀释:对病毒原液进行一系列梯度稀释(如 10−1,10−2,10−3,10−4
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siRNA是从牵牛花过表达发现的吗
siRNA(small interfering RNA, 小干扰RNA)并不是从牵牛花的过表达现象中发现的,而是从研究植物基因沉默和RNA干扰现象中逐步发展起来