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RNA转染影响因素
1.转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA
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细胞转染需要注意什么事项
1.细胞密度一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。2.细胞状态这点非常关键,很多时候传代次数太少或
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siRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇
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细胞培养常用的抗生素有哪些?
大多数实验室使用抗生素,但是如果无菌操作技术掌握得很好,抗生素其实也不是必需的。多数抗生素在37C 时的半衰期都很短,培养基内实际的抗生素浓度要比你以为的低。细
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细胞转染实验影响因素
转染效率受多种因素影响,主要因素有下面几个:1.转染试剂不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性
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电转染时,指数衰减脉冲形式的电转条件是什么?
对于engreen的Entranster-E电转染试剂,当使用0.4cm比色杯时,大多数细胞类型的指数衰减脉冲条件在200-300V的电压范围和800-100
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影响细胞转染效率的因素
1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传
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细胞转染效率的影响因素
1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次
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怎样做好siRNA细胞转染实验
1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸
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如何制备血清减量或无血清培养基?
目前,人们普遍认可单一类型细胞的最合乎生理的培养基是添加了蛋白质的、并且含有适当浓度的各种成分以及细胞外基质组分的限定培养基。材料基础营养培养基,如DMEM营养
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细胞转染实验的方法都有什么?
1. 电穿孔法。通过短暂的高电场电脉冲处理细胞,沿细胞膜的电压差异会导致细胞膜的暂时穿孔。DN被认为是穿过孔扩散到细胞内的。电脉冲和场强的优化对于成功的转染非常
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细胞周期测定实验有哪些,怎么做?
细胞计数法实验方法原理:体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂
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如何分离成纤维细胞?
下述的通用操作方案适用于小鼠、大鼠、仓鼠和鸡胚胎。选择大约一半足孕时间的胚胎最好,10 ~ 13 天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞,成纤维细胞可从这些细胞
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siRNA转染后如何在蛋白水平敲低
可能的原因:蛋白降解滞后性:即使mRNA水平在48小时时已经显著下降,但蛋白的降解可能需要更长的时间。蛋白具有相对较长的半衰期,因此在mRNA水平下降之后,蛋白
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高滴度反转录病毒和慢病毒载体的制备
一、试剂CaCl2 溶液( 2mol/L )、完全培养基、DMEM 培养基、乙醇(或异丙醇) (70% )、胎牛血清( FBS )、HBS 溶液(2X)、HEP