硅鱼精子DNA的制备

（1）在50ml灭菌聚乙烯管中加入1g鲑精DNA，加入15ml DEPC水使其浸泡5min至2h； 　　（2）加入2.5ml 2mol/L HCl，室温放置，DNA形成白色沉淀，充分振摇至沉淀物相互缠绕在一起，用吸头尖端使之形成一球团状（2～3min）； 　　（3）加入5.0ml 2mol/L的NaOH。摇动小管使DNA悬浮、溶解，将小管置50℃15min助溶； 　　（4）用DEPC水将混合物稀释至175ml（总体积），充分混合，注意确保管内已无颗粒状； 　　（5）加入20ml/l 1mol/L的Tris-HCl缓冲液（pH7.4）； 　　（6）用2mol/L的HCl滴定至DNA溶解pH为7.0～7.5； 　　（7）用无菌微孔滤膜过滤液体，去除颗粒。260nm测定溶液的OD值，方法是：取20μl DNA液混合于980μl水中，混匀后测定，吸收值乘以50即为DNA浓度（μg/ml）； 　　（8）制备好的DNA液储于-20℃备用，用前取出冻融后煮沸。