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生物化学

吸附层析

2025-05-10 生物化学 加入收藏
这是首次由Tswett 用来分离色素的层析方法。吸附剂的经典含义可能说成是一种表面具有吸咐分子的特性的固体(特别是当它是多孔的和分得很细的时候)。如氧化铝、硅胶

这是首次由Tswett 用来分离色素的层析方法。吸附剂的经典含义可能说成是一种表面具有吸咐分子的特性的固体(特别是当它是多孔的和分得很细的时候)。如氧化铝、硅胶、活性炭等固体物质都具有吸附性能,可以将一些物质自溶液中吸附到它的表面。它和离子交换换树脂不同,吸附剂表面和 分子的吸引力,理论上不含有静电力。吸附可以是非常特异的,以致于可以 从一个混合物中选择性地吸附一种物质。用这种方法所以能进行各种成分的 分离是由于它们被吸附剂所吸附的程度以及它们在分离用的溶剂中的溶解 度有差异。当然这些特点是由各成分的分子结构所决定的。 例如,在柱吸附层析中,混合物的分离是在装有适当吸附剂的玻璃柱中 进行的。混合物加到柱上,然后用一个适当的溶剂(或是混合溶剂)通过这个 柱。混合物就随着溶剂的流动而逐渐分开。最初溶剂刚倒在吸附柱上时,混 合物被吸附剂逐渐分开。最初溶剂刚倒在吸附柱上时,混合物全被吸附剂吸 附在柱的上层,当继续加入溶剂时,柱中就会连续不断地发生混合物中各物 质的溶解,吸附,再溶解,再吸附的反复交替过程。如被吸附的某物质被溶 剂解出来(解吸作用)后就随着溶剂向下面流动,当遇到新的吸附颗粒时, 又从溶剂中吸附出来,后面继续流下来的新溶液又再把它溶解出来并被带着 往下移动,又再被吸附。就这样,经过一段时间之后,混合物中各物质都会 从柱顶向下移动一段距离,但是由于各物质被吸附剂吸附的程度以及它们被 溶剂溶解的能力不同而向下移动的距离不同因而彼此分离。吸附性弱的,就 比较容易被溶剂溶出,又因为它再被吸附的力量比较弱,所以在柱中移动的 距离就大些。经过适当的时间后,混合物中各物质就可以完全分开。 现在一般最常用的方法是在各组分离以后,让柱继续展开,用溶剂把被 吸附的物质由吸附柱上冲洗出来,部分地收集从柱上流出的洗脱液,随后再 进行分析。 对任何一种特殊的吸附剂和溶剂洗脱系统的选择由所要完成的分离来决 定。在选择吸附剂时必须小心,因为有时一些吸附剂在分离时可引起某些化 合物的降解。 吸附层析的操作方式在柱型和薄层两种。

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