荧光素

荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光，停止能量供给，发光也瞬时停止（一般持续10-7～10-8s）。可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光色素。目前主要常用的荧光色素有以下3种： （一）异硫氰酸荧光素（Fluorescein isothiocyanate, GITC） 呈黄色、橙黄或褐黄色粉末或结晶，性质稳定，在室温下能保存2年以上，在低温中可保存多年。易溶于水和酒精。最大吸收光谱为490～495nm，最大发射光谱为520～530nm，呈现黄绿色荧光，分子量为398.4（图3-5）。 在碱性条件下，FITC的异硫氰酸基在水溶液中与 免疫球蛋白 的自由氨基经碳酰胺化而形成硫碳氨基键，成为标记荧光 免疫球蛋白 ，即荧光 抗体 。反应式如下（图3-6）： 一个Ig分子上最多能 标记15～20个FITC分子。 图3-5　FITC的吸收光谱和发射光谱   图3-6　 抗体 的FITC标记反应式