免疫金银染色（IGSS）操作流程

（一）石蜡切片IGSS

（1）切片脱蜡至水。

（2）0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min（98℃），自然冷却至室温。

（3）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×3min.

（4）l%EA（卵蛋白）15min,不洗。

（5）适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h.

（6）0.05m01/L（pH7.4）TBS洗3×5min.

（7）0.02m01/L（pH7.4）TBS（内含0.1%BSA）洗10min.

（8）1%EA 15min,不洗，1:10~1:20稀释的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min.

（9）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.

（10）1%戊二醛洗10min.

（11）双蒸水洗5min.

（12）1%明胶洗5min.

（13）银避光显影8~15min.

（14）双蒸水洗15min.