免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation)：IgE的分离与提纯

（一）材料与试剂

1 ．血清

2 ．饱和硫酸铵溶液

3 ．洗脱液 0.005Mol/L pH7.4PB 液

0.025 Mol/L pH7.4PB 液

0.01Mol/L pH7.4PBS 液 (0.14mol/L NaCl)

4 ． DE52

5 ． SephadexG150

（二）操作方法

1 ．取血清倍比稀释后，加等量饱和（ NH4 ） 2 SO4 溶液，盐析。

2 ．离心取沉淀，溶于少量生理盐水中，透析、除盐。

3 ．过 DE52 柱，以 0.005Mol/L pH7.4PB 液洗脱，收集洗脱蛋白峰 (IgG) ，弃去。

4 ．换以 0.025Mol/L pH7.4 PB 液洗脱，洗下的蛋白峰主要是 IgE 。

5 ．透析除盐。

6 ．过 G150 柱，以 0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl) 洗脱，收集洗脱液即为纯化的 IgE 。

7． 浓缩、鉴定。