免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation)：IgA的分离与提纯

（一）材料与试剂配制

1 ． DEAE52 纤维素

2 ． 0.10Mol/L ZnSO4 液

ZnSO4 · 7H2 O 2.88g

加水至 1 000.00ml

3 ．饱和硫酸铵溶液

4 ． 10 ％ EDTA — Na

5 ． SephadexG200

6 ． 0.01Mol/L pH7.4PB 液

7 ． 0.10Mol/L pH6.4PB 液

8 ．血清

（二）操作方法

1 ．取血清加等量的 0.1Mol/L ZnSO4 液，调 pH 至 7.0 ，室温搅拌 1h ，离心去沉淀。

2 ．于上清液中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置 30min 或冰箱过夜。

3 ． 10 000r/min 离心 10min ，去上清。

4 ．取沉淀溶于 4ml10 ％ EDTA － Na 溶液中。

5 ．生理盐水中透析除盐。

6 ．过 DE52 柱，用 0.01Mol/L pH7.4PB 液洗脱蛋白（ IgG ）弃去。

7 ．换用 0.1Mol/L pH6.4PB 液洗脱，收集蛋白峰，即为 IgA 。

8 ．再过 SephadexG200 柱，洗液为 0.01Mol/L pH7.4PBS （ 0.14Mol/L NaCl ），收集洗脱液测 OD280 值，取第一峰即为纯化 IgA 。

9 ．透析、浓缩、鉴定。