聚蔗糖-泛影葡胺法分离嗜碱性粒细胞

[试剂及配制]

(1)聚蔗糖-泛影葡胺分层(D=1.085)

(2)HEPES-ACM缓冲液：HEPES25mmol/L中含CaCl21mmol、NaCl130mmol、KCl5mmol、MgCl21mmol，用1mol/LNaOH调节至pH7.4。

(3)无Ca2+、Mg2+Hank’s液

[操作方法]

(1)取肝素抗凝血3ml，与等体积的HEPES-ACM缓冲液混匀后，叠加在3ml密度为1.085的分层液上，2000r/min离心20min。

(2)吸取中间层白细胞，用无Ca2+、Mg2+Hank’s液洗2次，每次1200r/min离心10min。弃上清，

(3)调整细胞浓度，涂片染色计数，嗜碱性粒细胞纯度大于90%。