结核耐药性检测芯片

结核耐药性检测芯片       结核 病是一种高发病，如今世界上有1／3的人曾感染结核分枝杆菌，每年有800万新患者出现，300万人死于结核病，同时结核分枝杆菌耐药菌株持续增加。       为了指导化疗药物的选择、观察社会中耐药结核分枝杆菌的流行，有必要进行耐药性的药敏试验。目前结核分枝杆菌的药敏试验仍采用传统的绝对浓度法、比例法等。但由于结核分枝杆菌生长缓慢，而耐药菌株的生长更为缓慢，使耐药性测定需要6～8周时间，不能在患者治疗的初期即提供耐药信息，而且耐药性界限不统一，药敏试验精度与临床实用性要求难以两全，故使目前的化疗方案不能科学地遵从个体化的原则，不但造成财力上的浪费，而且导致药物毒副作用。更严重的是，由于用药不当而导致的获得性耐药及由于传染源得不到及时控制，对社会乃至医护人员造成危害。       近年来，几种主要抗结核药物作用的分子机制及其耐药性的分子基础已有所了解，已确定主要为基因组突变引起耐药性的抗结核药物有异烟肼、利福平、链霉素、吡嗪酰胺、乙酸丁醇、丙硫异烟胺(1321th)、喹诺酮类(FQ)、甲红霉素等。每一种耐药性均涉及结核分枝杆菌一个或多个基因的突变、缺失或颠换等。       抗结核药物RFP的主要作用是抑制结核分枝杆菌依赖DNA的RNA聚合酶，抑制转录过程，导致细胞死亡。96％RFP耐药菌株编码RNA聚合酶β亚单位的rpoB基因78bp区域(508―533位)发生突变，碱基插入或缺失使RFP与RNA聚合酶亲和力明显减小，是结核分枝杆菌耐RFP的主要机制。研究表明，rpoB基因突变分布在78个碱基26个氨基酸范围内，突变频率最高的是氨基酸密码子531，次之为526及516。尽管有一些文献报道的突变范围有些不同，但突变集中在rpoB基因核心区域却是一致的，基因突变的检出率都在90％以上，结核分枝杆菌对RFP的耐药性是其药性的重要参数。上海博星基因芯片有限公司进行了结核分枝杆菌耐RFP检测芯片的研制，该芯片能够检测507、511、513、515、516、522、526、531共8个与耐RFP相关的rpoB基因密码子突变。