免疫胶体金电镜技术

免疫胶体金电镜技术     胶体金标记抗体技术建立于20世纪70年代初，因胶体金液呈樱桃红色，故标记抗体后进行免疫染色，可直接光镜观察。金颗粒的电子密度相当高，电镜下清晰可辨。因此近年来该技术被广泛应用于生物学和医学各领域的电镜研究，自20世纪80年代开始，有取代免疫酶细胞化学电镜技术之趋势。目前。国内外已有不同直径的金颗粒标记的各种间接抗体(第二抗体)商品出售，实验需要时可直接购买。     该技术的主要优点：     ①省时．程序较酶标抗体法简单；     ②不需H2O2等处理，对组织细胞超微结构保存较好；     ③金颗粒电子密度高，电镜下容易识别，且易于同其他免疫反应产物区别；     ④可与酶标抗体或铁蛋白标记抗体等相结合进行双标记染色，研究两种不同抗原在超微结构水平的定位；     ⑤也可用不同直径的金颗粒标记不同的抗体，研究两种以上抗原的共存；     ⑥因抗原抗体反应部位结合金颗粒数量的多少与抗原的量呈正相关，故可用于组织细胞抗原的半定量分析；     ⑦将胶体金标记的第一抗体直接加入培养液中，利用培养细胞具有吞饮作用的特点，可进行培养细胞内的抗原定位研究；     ⑧金颗粒具有较强激发电子能力，故也可用于扫描电镜对细胞表面抗原或一些受体的定位观察；     ⑨胶体金液无毒，对人体亦无损伤。因此，胶体金标记抗体染色技术是目前免疫电镜技术最常用的理想染色方法。