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不连续梯度法（氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环 DNA 实验）
原理通过不连续或预先形成的氯化铯（CsCl）梯度离心，可在离心管中获得含有不同浓度 CsCl 的溶液分层，样品位于中层（三级梯度法）或底层（两级梯度法）。材料与
2024-05-22 44 -
连续梯度法（氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环 DNA 实验）
原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于与线状 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。材料与仪器粗制质粒
2024-05-22 102 -
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
原理欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭，常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。材料与仪器DNA 样品乙醇 水饱和
2024-05-22 38 -
用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验
原理经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除，随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。材料与仪器DNA 样品乙醇 HCl NaCl 酚 氯
2024-05-22 54 -
NaCl离心法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸
原理常规的质粒 DNA 制备物中都会不同程度地污染有来自宿主菌基因组或质粒断裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。尽管它们的分子质量不大，但数量多，会对制备物中
2024-05-22 31 -
DNA的提取实验
原理酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，位于水相与有机相的界画，从而达到纯化核
2024-05-22 33 -
氯化锂沉淀法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸
原理氯化锂沉淀法去除质粒制备物中小片段核酸（包括 DNA 和 RNA ) 的原理是基于两种核酸在氯化锂溶液中的溶解度有所不同。氯化锂是强脱水剂，可降低 RNA
2024-05-22 36 -
质粒DNA的去磷酸化实验
原理去除 5‘ 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中，DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的
2024-05-22 45 -
建立随机重叠 DNA 插入文库实验
材料与仪器乙酸铵 ATP 乙醇 甘油 蒸馏水 IPTG MgCl2 NaCl 酚 聚乙二醇 TE TM 缓冲液 Tris-HCl TTE 缓冲液 X-gal T
2024-05-22 38 -
向平末端DNA连接合成接头实验
原理接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段，一般长 8~16 个核苷酸，互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。材料与仪器T4 噬菌体连接
2024-05-22 70 -
在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA实验
原理质粒克隆操作最费时间的步骤是用电泳的方法对预期大小的外源 DNA 片段和质粒 DNA 片段进行纯化，在以下的方案中（取自Struhl 1985)，质粒和外源
2024-05-22 48 -
CTAB法（植物总 DNA 的快速少量抽提实验）
原理CTAB法：该方法简便、快速，DNA产量高(纯度稍次，适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂，植物材料在CTAB的处理下，结合65 C水浴
2024-05-22 61 -
总 DNA 质量检测及酶切实验
原理在pH值为8.0~8.3时，核酸分子碱基几乎不解离，磷酸全部解离，核酸分子带负电，在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物，在分子筛的作用下
2024-05-22 31 -
DNA 的琼脂糖凝胶电泳实验
原理DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电，在电场中
2024-05-22 58 -
常规方法（DNA片段的回收实验）
材料与仪器NA片段纯化试剂盒 异丙醇离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置步骤1. PAGE电泳，如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断，如龈染
2024-05-22 27
